納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體促進(jìn)水飛薊素口服吸收的研究.pdf

1、水飛薊素(silymarin，SM)系從菊科植物水飛薊的種子中提取的一類黃酮木脂素類成分，臨床上多用于治療急、慢性肝病。但是由于其水溶性和透過(guò)性都很差，水飛薊素的生物利用度很低，使其臨床應(yīng)用受到了極大的限制?，F(xiàn)有的一些給藥系統(tǒng)雖在一定程度上可以提高水飛薊素的口服生物利用度，但其自身往往存在物理穩(wěn)定性差、載藥量低、生物相容性差等多方面的問(wèn)題。尋找新型給藥系統(tǒng)或改善現(xiàn)有給藥系統(tǒng)以提高水飛薊素的生物利用度，對(duì)其高效制劑的進(jìn)一步研發(fā)具有重要意義

2、。本文設(shè)計(jì)制備了水飛薊素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(SM-NLC)新型給藥系統(tǒng)，旨在提高水飛薊素的生物利用度;同時(shí)在細(xì)胞模型上和整體動(dòng)物上對(duì)其促進(jìn)口服吸收的機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　以油酸、混合硬脂酸甘油酯分別作為液體和固體脂質(zhì)，磷脂及吐溫80作為混合乳化劑，熔融高壓均質(zhì)法制備納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體。油相與水相分別加熱至80℃，藥物和磷脂溶于適量氨水乙醇溶液后再分散到油相當(dāng)中，油相與水相在高剪切作用下混合形成初乳，最后經(jīng)過(guò)高壓均質(zhì)機(jī)乳勻即得。對(duì)影響

3、NLC粒徑、包封率、載藥量的處方因素和制備條件進(jìn)行了考察:處方因素中藥脂比及乳化劑/脂質(zhì)比例對(duì)NLC的制備結(jié)果具有較大的影響，而工藝因素中均質(zhì)壓力對(duì)NLC的粒徑也具有較大影響。為了獲得較高的包封率和載藥量以及合適的粒徑，篩選得到的最佳制備條件為:藥脂比4/29(w/w)，乳化劑與脂質(zhì)比例20/29(w/w)，液體與固體脂質(zhì)比9/20(w/w)，油相與水相比2.9/30(w/v)，均質(zhì)壓力20000 psi，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)為5次。在此條件下

4、制得的NLC呈類球形，平均粒徑約為80 nm，Zeta電位約為-65 mV，包封率為87.55％，載藥量為8.32％。
　　根據(jù)最優(yōu)處方和制備工藝制備的水飛薊素NLC，體外釋放緩慢，12h在水中僅釋放25％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自制水飛薊素固體分散體微丸1h的釋放量(90％)，以及市售Legalon(R)膠囊12h的釋放量(67％)。但在體外脂解條件下，1h內(nèi)藥物可以釋放完全。脂解液經(jīng)超高速離心分離后，少部分分布于油相中4.63％;水相與沉淀

5、相中分布相當(dāng)，分別為46.15％和49.22％。其中水相中溶解的藥物可能以膠束或混合膠束形態(tài)存在，最易被小腸吸收。
　　以市售Legalon(R)膠囊及自制固體分散體微丸為參比制劑，水飛薊素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體為受試制劑，Beagle犬為動(dòng)物模型，采用自身對(duì)照交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，進(jìn)行了藥物動(dòng)力學(xué)研究。在0-8 h內(nèi)定時(shí)取血，采用液液萃取的方法提取血漿中的藥物，HPLC法測(cè)定藥物含量。經(jīng)過(guò)計(jì)算得到的藥時(shí)曲線和藥動(dòng)學(xué)參數(shù)顯示，水飛薊素納米結(jié)構(gòu)脂

6、質(zhì)載體體內(nèi)吸收速度快于市售Legalon(R)膠囊以及固體分散體微丸，其生物利用度分別是Legalon(R)膠囊以及固體分散體微丸的2.55倍和3.11倍。結(jié)果表明納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體可顯著提高水飛薊素的口服生物利用度。
　　在吸收機(jī)理研究過(guò)程中，共制備了六種納米脂質(zhì)制劑，其中NLC組包括SM-NLC、速溶SM和空白NLC混合體系(SMSD-NLC混合體系)、SM-NLC脂解液，SLN組包括SM固體脂質(zhì)納米粒(SM-SLN)、速溶SM

7、和空白SLN混合體系(SMSD-SLN混合體系)、SM-SLN脂解液。Beagle犬體內(nèi)比較了它們的生物利用度，其中兩種脂質(zhì)納米粒均明顯高于同組的其他脂質(zhì)制劑;NLC組中，SMSD-NLC混合體系和SM-NLC脂解液的生物利用度分別是SM-NLC的65.71％和74.86％; SLN組中SM-SLN混合體系和SM-SLN脂解液分別是SM-SLN的40.09％和58.56％。而含脂質(zhì)制劑的生物利用度又明顯高于不含脂質(zhì)的速釋制劑，將藥物的固

8、體分散體溶解于空白脂質(zhì)納米粒懸液中給藥的生物利用度比固體分散體的高出約2倍。結(jié)果表明脂質(zhì)成分的存在和脂質(zhì)納米粒結(jié)構(gòu)的完整性均是影響脂質(zhì)納米粒促進(jìn)藥物吸收的重要因素。脂質(zhì)納米粒促進(jìn)藥物口服吸收的機(jī)制除脂解作用外，還可能存在其他促吸收機(jī)制。
　　細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)中，建立了Caco-2單層細(xì)胞模型，于頂側(cè)加入脂質(zhì)納米粒(NLC/SLN)、藥物-空白脂質(zhì)納米?；旌象w系(NLC/SLN)及固體分散體，在基底側(cè)2小時(shí)內(nèi)定時(shí)取點(diǎn)，HPLC法測(cè)定各制

9、劑的累積轉(zhuǎn)運(yùn)量并計(jì)算Papp值。結(jié)果顯示，五種制劑在2小時(shí)內(nèi)的累積轉(zhuǎn)運(yùn)量及Papp值無(wú)明顯差異。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果與動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不相符，推測(cè)，脂質(zhì)納米粒進(jìn)入體內(nèi)后除了跨小腸上皮吸收外可能存在其他的吸收機(jī)制。細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，脂質(zhì)納米粒(NLC/SLN)的細(xì)胞攝取量明顯高于同組藥物-空白脂質(zhì)納米粒混合體系及固體分散體溶液，說(shuō)明脂質(zhì)納米?？梢源龠M(jìn)細(xì)胞內(nèi)化作用，進(jìn)而提高攝取量。該作用機(jī)制有待進(jìn)一步深入研究。
　　綜上，本文中制備了水飛