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文檔簡介
1、糖代謝紊亂在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用,而葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-1(GLUT1)作為調(diào)節(jié)葡萄糖進入細胞的主要載體,其基因表達及功能狀態(tài),有可能是決定視網(wǎng)膜是否受累的因素之一。關(guān)于GLUT1在糖尿病病程中的表達變化,目前尚有爭議。高糖、缺氧、氧化應激、AngiotensinⅡ、VEGF等均參與調(diào)節(jié)GLUT1的表達。最近有研究表明,Akt(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,又稱PKB)的激活可調(diào)節(jié)GLUT1的表達。Angiopoietin(A
2、ng)是最近新發(fā)現(xiàn)的血管調(diào)節(jié)因子,其中Ang1的作用有:參與新生血管生成;抑制炎癥及滲出;抑制粘附與凋亡等。在糖尿病病程中,Ang1在視網(wǎng)膜有所表達,可能參與了糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)展。已有研究證實Ang1與其受體Tie2結(jié)合后可激活Akt。綜上所述,Ang1可通過Tie2受體調(diào)節(jié)Akt的活性,而Akt又可調(diào)節(jié)GLUT1活性,那么,GLUT1與Ang1在糖尿病視網(wǎng)膜中表達部位及數(shù)量究竟如何;在糖尿病視網(wǎng)膜病變中是否有一定的作用;Ang1能
3、否通過Akt來調(diào)節(jié)GLUT1的表達,進而影響視網(wǎng)膜的糖代謝過程?本研究將檢測糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中Ang1與GLUT1的含量,并初步分析兩者之間的相關(guān)性,為臨床診斷治療提供理論依據(jù)。 材料與方法: 健康雄性Wistar大鼠40只,體重180-220g。隨機選出10只作為正常對照組(NC組),另外30只采用鏈脲佐菌素(STZ)溶液腹腔一次性注射建立糖尿病模型(成模20只),確定成模后隨機分為2組:糖尿病血糖未控制組(DM1組)
4、和糖尿病血糖控制組(DM2組),每組10只。利用腹腔內(nèi)注射魚精蛋白鋅胰島素(PZI)將2個糖尿病組大鼠血糖分別控制在>16.7mmol/L、和<14mmol/L兩個水平。標準飼養(yǎng)3個月后取血測定糖化血紅蛋白(HbA1c),并分離大鼠視網(wǎng)膜,利用免疫組化方法進行GLUT1蛋白的檢測,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)方法檢測Ang1mRNA含量。統(tǒng)計學分析:所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差((X)±SD)表示,采用SPSS11.0軟件處理。
5、樣本間均數(shù)的比較采用t檢驗,變量間的關(guān)系采用直線相關(guān)分析。P<0.05表示有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果: 1、實驗期間DM1、DM2兩組糖尿病大鼠體重明顯低于NC組大鼠同期體重,而血糖和糖化血紅蛋白(HbA1c)則顯著高于NC組大鼠。 2、免疫組化染色顯示NC組大鼠視網(wǎng)膜中可見GLUT1陽性染色顆粒,DM1組、DM2組大鼠視網(wǎng)膜中GLUT1陽性染色顆粒明顯增加,且DM1組比DM2組增加更明顯。 3、RT-PCR結(jié)
6、果顯示三組大鼠視網(wǎng)膜中均含Ang1mRNA。與NC組相比,DM1組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)Ang1mRNA表達增加了107.24%,DM2組大鼠增加了46.07%,差別均具有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。 4、相關(guān)分析表明Ang1與GLUT1表達具有相關(guān)性,呈正相關(guān),pearson相關(guān)系數(shù)為r=0.512(p<0.05)。 結(jié)論: 1、糖尿病高血糖狀態(tài)下,大鼠視網(wǎng)膜中GLUT1蛋白表達較正常對照組增加,尤以血糖未控制組增加明顯
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