沉默SIRT6對心臟成纖維細胞表型轉(zhuǎn)化的影響及其機制研究.pdf

1、目的：心臟衰竭已成為心血管疾病的主要死因。隨著生活水平的提高，環(huán)境改變及抗生素濫用，心臟衰竭發(fā)病率不斷上升，疾病負擔不斷增加，治療費用不斷攀升，已成為嚴重的公共衛(wèi)生問題。心臟衰竭是多種心臟疾病的最終歸宿。心肌衰竭的機制是心肌重塑，心肌纖維化是其中重要因素之一，而心臟成纖維細胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞是心肌重塑的初始事件。目前仍缺少客觀有效的心臟衰竭的檢測指標，因此尋找可靠的心臟衰竭的分子標記物迫在眉睫。本研究重點探討SIRT6在心臟成纖維細胞

2、表型轉(zhuǎn)化中的潛在作用及其作用機制，探索其作為心肌纖維化及心臟衰竭分子標志物的可能性，為在人群中心肌纖維化及心臟衰竭的預防提供新的思路。
　　方法：本研究以體外培養(yǎng)的原代SD大鼠心臟成纖維細胞作為實驗模型，在Ang-Ⅱ誘導的（心肌成纖維細胞）CFs纖維化模型使用RT-PCR檢測Sirtuins家族各成員mRNA表達變化。并進一步使用Western-blot技術(shù)檢測SIRT6在不同濃度和不同作用時間Ang-Ⅱ的作用下的蛋白表達變化。沉

3、默SIRT6后，分別使用RT-PCR、Western-blot和免疫熒光檢測CFs表型轉(zhuǎn)化指標α-SMA、paxillin、vinculin表達變化。為確認SIRT6調(diào)節(jié)CFs表型轉(zhuǎn)化時候是通過NF-κB，我們使用NF-κB特異性抑制劑逆轉(zhuǎn)了沉默SIRT6升高肌成纖維細胞（MyoFbs）分子標志的表達。
　　結(jié)果：在Ang-Ⅱ誘導的CFs纖維化模型使用RT-PCR檢測Sirtuins家族各成員mRNA表達變化。研究發(fā)現(xiàn)SIRT1和