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1、目的:1.研究建立杜仲藥材主要有效成分的含量測(cè)定方法,對(duì)不同生長(zhǎng)年限,不同采收時(shí)間,不同部位,不同加工、儲(chǔ)藏方法杜仲藥材中主要有效成分的含量進(jìn)行測(cè)定,探明杜仲藥材不同采收時(shí)間、不同加工、儲(chǔ)藏過程對(duì)其主要有效成分的影響,為規(guī)范杜仲藥材的采收、初加工及儲(chǔ)藏過程提供科學(xué)依據(jù)。
2.研究探討近紅外漫反射法用于杜仲藥材主要有效成分含量測(cè)定的可行性,為建立更為簡(jiǎn)便快速的含量測(cè)定方法提供依據(jù)。
方法:1.采用高效液相色譜法,以杜仲
2、中主要有效成分松脂醇二葡萄糖苷、桃葉珊瑚苷和綠原酸的含量為考察指標(biāo),測(cè)定杜仲中主要有效成分的含量。松脂醇二葡萄糖苷色譜條件為:流動(dòng)相:甲醇-水(25:75),檢測(cè)波長(zhǎng):277nm,進(jìn)樣量:10μl,流速1mL/min,柱溫:25℃;桃葉珊瑚苷色譜條件為:流動(dòng)相:甲醇–水(10:90),檢測(cè)波長(zhǎng):203 nm,進(jìn)樣量:10μL,流速1 mL/min,柱溫:25℃;綠原酸色譜條件為:流動(dòng)相:乙腈-0.4%磷酸(13:87),檢測(cè)波長(zhǎng):327
3、 nm,進(jìn)樣量:20μl,流速1 mL/min,柱溫:25℃。
2.用近紅外漫反射法技術(shù)測(cè)定杜仲藥材內(nèi)皮粉末的近紅外光譜。經(jīng)對(duì)光譜進(jìn)行一階導(dǎo)數(shù)和減去一條直線相結(jié)合處理后,利用7502~4597.6 cm-1范圍區(qū)間內(nèi)提取得到的光譜信息,用于測(cè)定杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量。
結(jié)果:1.建立了杜仲中三種主要有效成分含量測(cè)定的方法。
2.不同生長(zhǎng)年限杜仲皮中松脂醇二葡萄糖苷、桃葉珊瑚苷及綠原酸的含量測(cè)定結(jié)果表明,
4、杜仲基本上以生長(zhǎng)期在13-22年間,其皮中主要有效成分含量為最高。不同部位杜仲中松脂醇二葡萄糖苷、桃葉珊瑚苷、綠原酸的含量測(cè)定結(jié)果表明,杜仲皮、葉、枝中均含有綠原酸,且以葉中含量最高;其他兩個(gè)成分則在杜仲內(nèi)皮中含量最高。
3.不同儲(chǔ)藏方法對(duì)杜仲中主要有效成分的含量變化研究結(jié)果表明,以紙箱儲(chǔ)藏為杜仲最好的存放方式。對(duì)于儲(chǔ)藏時(shí)間,最好不要超過6個(gè)月,特別是桃葉珊瑚苷和綠原酸兩種成分,在存放6個(gè)月之后,含量降低得非常嚴(yán)重。
5、 4.建立了近紅外光譜技術(shù)快速測(cè)定杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量的方法。選取了三個(gè)不同產(chǎn)地的41個(gè)杜仲樣品,用高效液相色譜法測(cè)定其松脂醇二葡萄糖苷含量,用近紅外光譜儀漫反射方式在12000~4000 cm-1范圍內(nèi)采集相應(yīng)樣品的光譜,利用儀器自帶的OPUS軟件優(yōu)選了光譜的預(yù)處理方法,并用偏最小二乘法(PLS)建立松脂醇二葡萄糖苷含量和光譜數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性模型。結(jié)果表明,對(duì)光譜進(jìn)行一階導(dǎo)數(shù)和減去一條直線相結(jié)合處理后,在7502~4597.6
6、cm-1范圍區(qū)間內(nèi)能最有效地提取光譜中的信息,經(jīng)交叉驗(yàn)證后校正集相關(guān)系數(shù)(r2)為0.9264,校正集標(biāo)準(zhǔn)偏差(SEC)為0.029,預(yù)測(cè)集標(biāo)準(zhǔn)偏差(SEP)為0.026。說明杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量和近紅外光譜之間存在良好的相關(guān)性,適合于此中藥指標(biāo)性成分的快速分析。
結(jié)論:本研究確定了杜仲藥材最佳的采收期、初加工方法及儲(chǔ)藏方式,為杜仲藥材的合理利用提供了科學(xué)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果對(duì)于揭示杜仲藥材采收、初加工、儲(chǔ)藏的科學(xué)內(nèi)涵,
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