海洋抗腫瘤活性肽tasiamide衍生物的制備及tasiamide B全合成研究.pdf

1、本文內(nèi)容分為兩部分:1)制備了11個tasiamide結(jié)構(gòu)類似物,進(jìn)一步探討了其構(gòu)效關(guān)系;2)完成了具有抗腫瘤活性的海洋多肽tasiamide B的首次化學(xué)全合成并修正了其結(jié)構(gòu)。
　　 Tasiamide是Moore小組2002年從海洋藻青菌Symploca.sp中分離得到的一個結(jié)構(gòu)新穎的鏈?zhǔn)狡唠?對KB(人口腔鱗癌)和LOVO(人腸癌細(xì)胞)具有良好的抑制活性。此七肽已由本小組馬振華碩士和宋妮碩士完成了其全合成及結(jié)構(gòu)修正,并進(jìn)行

2、了初步的構(gòu)效關(guān)系研究。為更深入地闡明其構(gòu)效關(guān)系,我們分別采用“4+1+2”策略、“2+2”策略以及順序合成策略合成了11個tasiamide衍生物,為今后的工作奠定了良好的基礎(chǔ)。
　　 Tasiamide B是Moore小組2003年從藻青菌Symploca sp NIH304樣品的相同親脂性提取物中再次分離出的一個線性八肽,對KB細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用,其IC50值為0.8μM/mL。鑒于它與tasiamide結(jié)構(gòu)上和活性上的相

3、似性,我們選擇了tasiamide B作為研究對象,對其進(jìn)行了化學(xué)全合成研究。
　　 以幾種商品化的氨基酸為原料,采用逐步延伸法制備了四肽block1;發(fā)現(xiàn)L-乳酸與H-Val-Obn縮合時,乳酸的α位會發(fā)生較大程度的消旋化。以芐醚將乳酸α-醇羥基封閉可以有效地避免這一問題。采用這一方法成功地制備了高光學(xué)純度的block 3(Bn);
　　 參照文獻(xiàn)方法,以光學(xué)活性的H-Phe-OH為原料,經(jīng)過5步反應(yīng),高收率、高立體選

4、擇性地得到了帶有保護(hù)基的(3S,4S)-4-氨基-3-羥基-5-苯基酸(Ahppa)。
　　 以噁唑烷酮還原開環(huán)的方法制備了Fmoc-N-Me-Gln-OH(st-3),在后續(xù)的反應(yīng)中,首次發(fā)現(xiàn)N-甲基化的谷氨酰胺側(cè)鏈裸露的酰胺基團(tuán)會引起嚴(yán)重的分子內(nèi)環(huán)化。曾嘗試將側(cè)鏈轉(zhuǎn)化為芐酯基團(tuán)、氰基基團(tuán)的谷氨酰胺衍生物來代替谷氨酰胺,但效果均不理想。最終通過成功合成Cbz-N-Me-Gln(Trt)-OH,封閉了側(cè)鏈的親核活性,并防止被親核

5、試劑進(jìn)攻,以一種簡單高效的方法向兩端延伸,成功合成了四肽block 2-3(tr);將其與block1縮合,生成芐醚保護(hù)的八肽tasiamide B(P),然后鈀碳?xì)浣獾玫阶罱K產(chǎn)物tasiamide B。
　　 通過對合成樣品的核磁共振數(shù)據(jù)的分析,發(fā)現(xiàn)所合成化合物與天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)不符,其差別主要集中在N-Me-Phe和Ala兩個氨基酸單元上;進(jìn)一步的比旋光度測試也顯示了較大的差異。為了確定天然產(chǎn)物的真實(shí)結(jié)構(gòu),本文設(shè)計(jì)合成了tasi

6、amide B的三個非對映異構(gòu)體:以N-Me-D-Phe替換N-Me-L-Phe的化合物tasiamide B-DPLA(1a),以D-Ala替換L-Ala的化合物tasiamide B-LPDA(1b)和兩個都被替換的化合物tasiamide B-DPDA(1c)。通過仔細(xì)比對1a,1b,1c與文獻(xiàn)的核磁共振數(shù)據(jù)和比旋光值,確定了天然產(chǎn)物的正確結(jié)構(gòu),即:tasiamide B中所含的N-甲基苯丙氨酸的構(gòu)型為D-型,而非文獻(xiàn)報(bào)道的L-型