乙型肝炎病毒分子流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、乙型肝炎病毒分子流行病學(xué)調(diào)查乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球范圍的重大公共衛(wèi)生問題。我國(guó)是乙型肝炎高發(fā)區(qū)。按照1992年全國(guó)乙型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果普通人群HBV感染陽(yáng)性率為10％推算,我國(guó)現(xiàn)有慢性無(wú)癥狀的乙型肝炎病毒攜帶者超過1億,每年約30萬(wàn)名患者死于肝硬化、肝癌等乙肝相關(guān)疾病。 HBV基因組變異是突變的隨機(jī)性和選擇的有序性作用的結(jié)果,機(jī)體免疫系統(tǒng)和藥物對(duì)HBV的選擇壓力與HBV基因進(jìn)化及突變有關(guān)。根據(jù)HBV全基因序列異

2、質(zhì)性≥8％可將其分為A～H8種基因型,每種基因型還可分為亞型和準(zhǔn)種。研究表明,各基因型及亞型有一定的地理和人群分布特點(diǎn),且與人類活動(dòng)有關(guān)；各基因型的臨床轉(zhuǎn)歸、對(duì)抗病毒治療的應(yīng)答、耐藥突變及其血清學(xué)轉(zhuǎn)換規(guī)律之間具有顯著差異。因此,研究HBV基因型及其基因進(jìn)化規(guī)律對(duì)HBV感染的預(yù)防和控制具有十分重要的意義。研究表明,我國(guó)的HBV基因型A-D型均有分布,其中以C、B基因型為主,但相關(guān)研究均存在樣本量少,區(qū)域局限,沒有深入到基因亞型的研究等缺陷

3、。我國(guó)目前缺乏對(duì)于HBV基因型分布的系統(tǒng)研究,這在一定程度上也制約了HBV基因型研究的發(fā)展。 目的：通過乙肝分子流行病學(xué)調(diào)查確定本地區(qū)HBV基因型及亞型的地理分布,建立一種快速靈敏、高通量的鑒定HBV基因型及亞型的方法以適合大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查并分析HBV基因型及亞型在肝臟疾病中的作用。 方法：通過多重PCR反應(yīng)對(duì)462例肝細(xì)胞癌患者(HCC組)、234例慢性乙肝患者(CH組)和110例HBV病毒攜帶者(ASC組)進(jìn)行HB

4、V基因型及亞型的鑒定；并對(duì)其中采取手術(shù)切除或TACE或兩者聯(lián)合治療的228例基因亞型為B2和C2的HCC患者隨訪觀察1年。通過回顧性的分子流行病學(xué)研究共調(diào)查298例AHB患者、588例對(duì)照和572例患者家庭成員,填寫調(diào)查表,抽取5ml血液樣本。 結(jié)果： 1.建立了快速簡(jiǎn)便的鑒定HBV基因型及亞型的型特異引物多重PCR方法。 2.探討HBV基因型及亞型在乙肝相關(guān)疾病中的分布規(guī)律以及在肝細(xì)胞癌(HCC)形成中的作用。

5、 檢測(cè)了中國(guó)東部地區(qū)(江蘇、浙江、安徽和上海)462例HBV DNA陽(yáng)性的HCC患者、234例慢性乙肝患者(CH)和425例乙肝攜帶者(ASC)的HBV基因型、HBV DNA拷貝量和HBeAg;462例HCC患者中,B2型62例(13.4％),C2型337例(72.9％),混合型49例(10.6％)；在HCC組和CH組內(nèi),混合型的病毒滴度高于C2型,且這兩組內(nèi)混合型所占的比例高于ASC組,HCC組的C2比例高于ASC組,HCC組

6、內(nèi)B2型從<30歲年齡組到50-59歲年齡組有下降趨勢(shì)。通過多因素回歸分析發(fā)現(xiàn),年齡≥40歲、HBV DNA拷貝量≥10,000是HCC形成的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,年齡≤50歲、B2亞型的患者比C2亞型HCC患者更容易復(fù)發(fā)。 3.上海地區(qū)AHB感染新的危險(xiǎn)因素以及AHB慢性化與基因型的關(guān)系。 通過回顧性的分子流行病學(xué)研究共調(diào)查298例AHB患者、588例對(duì)照和572例患者家庭成員,填寫調(diào)查表,抽取5ml血液樣本。多因素回歸分析表

7、明侵入性治療(AOR,3.72[95％C]2.55-5.42]),家庭內(nèi)密切接觸(AOR,3.05[95％CI 2.11-4.41]),美容保健(AOR,1.52[95％ CI,1.09-2.12]),無(wú)乙肝疫苗接種史(AOR,7.78[95％ CI,3.76-16.11])是AHB感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。AHB患者中25例轉(zhuǎn)成慢性乙肝,占8.4％。C2型AHB患者慢性化比例大于82型,B2型患者與C2型相比有更高的病毒滴度和HBeAg表達(dá)

8、。 結(jié)論： 1.HBV基因型及亞型的多重PCR方法是一種快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高通量的方法,適合大規(guī)模的流行病學(xué)調(diào)查。 2.上海及周邊地區(qū)HBV基因亞型以C2型為主,B2型次之,HCC、CH及ASC人群中的基因型構(gòu)成不同,通過HBV陽(yáng)性的肝細(xì)胞患者、慢性乙肝患者和無(wú)癥狀攜帶者三組人群中HBV基因型及亞型的分布及臨床指標(biāo)的差異確定上海及周邊地區(qū)HBV基因型及亞型在肝臟疾病譜中的分布,闡明了HBV混合基因型的感染發(fā)生HC