結合珠蛋白在腦出血后腦水腫形成中抑制作用的研究.pdf

1、目的:研究已證實,腦出血(ICH,intercerebral hemorrhage)后血腫中紅細胞溶解釋放的血紅蛋白Hb(hemoglobin)及Hb降解產物在腦出血后腦水腫形成中起著重要作用。結合珠蛋白Hp( haptoglobin)是血液中重要成分,可與Hb結合形成緊密的非共價復合物Hb-Hp,使Hb降解受抑制,據此推測Hp在腦出血后腦水腫形成中具有抑制作用。本課題擬通過在SD大鼠腦內研究自體全血中去除或外加Hp后對實驗性ICH模型

2、血腫中Hb及其代謝產物含量變化及其與血腫周圍腦組織含水量、血腦屏障變化、炎性細胞因子含量、自由基形成的關系。方法:將100只200-250g成年健康雄性SD大鼠隨機分成四組:假手術組(25只)、ICH組(25只)、Hp去除組(25只)、Hp干預組(25只)。①假手術組②ICH對照組③Hp去除組:斷尾取血100ul,采用親和層析法去除Hp。采用立體定向大鼠尾狀核注入去除Hp后的自體全血50ul制作。④Hp干預組:斷尾取血100ul,加入1

3、00ul所需Hp凍干粉相應量,采用立體定向大鼠尾狀核注入外加Hp后的自體全血50ul制作。按上述不同術后時間斷頸處死大鼠,仔細分離大腦及血腫標本進行相應處理.①觀察上述四組不同時間血腫中Hb及Hb降解產物(血紅素、CO、鐵離子、膽紅素)含量變化。采用免疫組化分析及分光光度法。②觀察腦組織含水量的變化③觀察腦組織自由基SOD、MDA含量變化④觀察上述四組不同時間血腫周圍腦組織炎性細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-a含量變化⑤觀察上述四

4、組不同時間血腫周圍腦組織血腦屏障病理變化:采作光鏡和電鏡觀察。結果:1.假手術組在術后各時點神經功能障礙評分、腦組織含水量、Hb及其降解產物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、SOD、MDA含量均未見明顯異常。2.ICH對照組、Hp去除組神經功能障礙評分和SOD活力顯著高于假手術組;腦組織含水量、Hb及其降解產物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、MDA含量顯著低于假手術組。3.Hp干預組神經功能障礙評分和SOD活力顯著高于IC

5、H對照組、Hp去除組;而腦組織含水量、Hb及其降解產物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、MDA含量顯著高于假手術組。結論:1.ICH后,大鼠出現明顯神經功能損害,腦組織含水量增加,出現血腫周圍腦組織水腫、炎性細胞浸潤、炎性細胞因子產生、自由基大量生成、MDA含量明顯升高,SOD活力明顯下降。2.ICH后3天紅細胞大量溶解,腦水腫達高峰,血腫周圍腦組織Fe含量、血紅素含量、UCB含量和CO含量顯著并且持續(xù)升高,腦水腫消退后血腫周圍腦