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文檔簡介
1、目的:
探討體外長期培養(yǎng)人骨髓間充質干細胞在不同時相的生物學特性的變化,為干細胞的體外安全性評估提供可靠的研究依據。
方法:
采用密度梯度離心、貼壁培養(yǎng)相結合的方法分離hBMSCs,進行長期體外培養(yǎng)。在不同培養(yǎng)時相,采用相差顯微鏡記錄hBMSC的形態(tài)變化,并記錄不同代數的細胞傳代所需時間,同時應用流式細胞技術檢測不同培養(yǎng)時相的細胞表面標志抗原表達變化和細胞周期變化。
結果:
2、 采用密度梯度離心、貼壁培養(yǎng)相結合的方法成功分離出hBMSCs,體外長期培養(yǎng)并追蹤觀察了25代,共248天。原代細胞培養(yǎng)早期(第15代之前),細胞的各項指標相對穩(wěn)定;而培養(yǎng)后期,細胞形態(tài)、增殖速度、細胞表面標志抗原表達均發(fā)生改變,表現(xiàn)為:生長速度減慢;CD44、CD90表達明顯下降;處于靜止期的細胞顯著減少,處于活躍增殖期的細胞比例顯著增加,凋亡細胞數量明顯增加。
結論:
體外長期培養(yǎng)人骨髓間充質干細胞
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