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1、目的:利用小鼠特應(yīng)性皮炎(AD)模型,探討甲殼質(zhì)對(duì)AD的作用及作用機(jī)制,為將來(lái)甲殼質(zhì)應(yīng)用于臨床治療特應(yīng)性疾病提供科學(xué)依據(jù)。
方法:將28只BALB/c小鼠隨機(jī)分成3組:對(duì)照組(N組)(8只)、模型組(M組)(10只)、甲殼質(zhì)組(E組)(10只)。先對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射OVA2次致敏小鼠,2次間隔5天,半月后再在其背部皮膚外敷OVA,誘發(fā)特應(yīng)性皮炎(模型組),每次外敷OVA一周,共外敷兩次,中間間隔兩周。在建模過(guò)程中甲殼質(zhì)組同時(shí)給
2、予3mg/d甲殼質(zhì)灌胃,為期4周,模型組與對(duì)照組每天給予等量的生理鹽水灌胃。建模成功后處死各組小鼠,取背部皮膚,部分進(jìn)行石蠟切片,HE和甲苯胺藍(lán)染色,顯微鏡下觀察組織學(xué)變化。部分皮膚提取總RNA,利用RT-PCR法檢測(cè)皮膚中細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中總IgE、總IgG2a和OVA-specific IgE的水平;取脾細(xì)胞及引流淋巴結(jié)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),ELISA法測(cè)定培養(yǎng)液中細(xì)胞因子的含量。
3、結(jié)果:HE染色結(jié)果顯示,與模型組小鼠比較,甲殼質(zhì)組小鼠皮膚激發(fā)處炎癥癥狀較輕,皮膚表皮層與真皮層增厚程度降低,真皮內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)總量(P<0.05)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量及肥大細(xì)胞數(shù)量(P<0.01)明顯減少。ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甲殼質(zhì)組小鼠血清中總IgE和OVA-specific IgE的水平明顯降低(P<0.05~0.001),IgG2a水平顯著升高(P<0.001)。甲殼質(zhì)組小鼠脾細(xì)胞及淋巴結(jié)細(xì)胞體外培養(yǎng)產(chǎn)生的IL-12及IFN-
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