萊克多巴胺人工抗原的制備及鑒定.pdf

1、萊克多巴胺(Ractopamine，RAC)是一種苯酚胺類β2腎上腺素受體激動劑，與“瘦肉精”鹽酸克倫特羅一樣具有促進營養(yǎng)再分配和生長的作用，因此被用作新型添加劑促進機體生長。由于萊克多巴胺具有在動物體內(nèi)蓄積殘留的特性，食用萊克多巴胺添加劑飼養(yǎng)的動物會引起人們不同程度的中毒反應(yīng)，具體表現(xiàn)為骨骼肌收縮增加，引起肌肉震顫。在我國已經(jīng)禁止其生產(chǎn)和銷售，但是非法使用的現(xiàn)象仍時有發(fā)生。目前，越來越多的分析方法被用于檢測RAC殘留，例如利用酶聯(lián)免疫

2、吸附測定法(ELISA)對RAC殘留進行初步篩查，再通過質(zhì)譜或者色譜進行確認(rèn)。與色譜法、質(zhì)譜法、生物傳感器法等藥物殘留檢測方法相比，免疫學(xué)分析方法不需要昂貴的儀器，具有操作簡單和可以進行高通量檢測的優(yōu)點，在RAC殘留檢測中發(fā)展迅速并已得到廣泛的應(yīng)用。
　　本研究通過三種不同的制備方法獲得萊克多巴胺人工抗原。其中采用1，4-丁二醚法（Linker法）制備RAC人工抗原，并把此方法制備的RAC-OVA作為包被原;此外，利用混合酸酐法制

3、備RAC人工抗原，最終獲得偶聯(lián)比分別為8∶1，17∶1，23∶1的RAC-BSA人工抗原;另外，本研究首次利用N'N-羰基二咪唑法一步制備RAC人工抗原，采用不同的溶劑得到濃度和偶聯(lián)比不同的RAC-BSA人工抗原。
　　采用物理學(xué)的方法（紫外光譜掃描和SDS-PAGE凝膠電泳）以及免疫學(xué)的方法(間接ELISA)鑒定人工抗原是否偶聯(lián)成功。
　　本研究利用三種不同制備方案成功獲得RAC人工抗原，并首次利用N'N-羰基二咪唑法成功