糖尿病腎病患者M(jìn)IOX的表達(dá)及其臨床意義研究.pdf

1、研究背景
　　糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病微血管并發(fā)癥的重要類型，也是引起終末期腎臟疾病(end stage renal disease，ESRD)的主要病因（約占40％-50％）。糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，已有大量研究證實(shí)多元醇通路活性增高、糖基化終末產(chǎn)物形成增加、蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)和RAS系統(tǒng)激活、GTP酶蛋白的活性變化、TGF-β-Smad信號(hào)通路的激

2、活等細(xì)胞分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑異常均參與了糖尿病腎病的發(fā)生與進(jìn)展，但其具體的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。目前臨床常用針對(duì)上述單個(gè)因素及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的治療干預(yù)措施如PKC抑制劑等療效有限。因此深入開展糖尿病腎病分子發(fā)病機(jī)制的研究，尋找糖尿病腎病新的治療靶點(diǎn)，一直是國(guó)內(nèi)外腎臟病學(xué)界研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)，具有重要的科學(xué)和社會(huì)意義。
　　傳統(tǒng)觀念認(rèn)為腎小球細(xì)胞損傷是糖尿病腎病的主要特征，但新近研究證實(shí)腎小管間質(zhì)損傷在糖尿病腎病中具有重要的意義，且腎小管間質(zhì)

3、病變并不繼發(fā)于腎小球病變，而是糖尿病腎病的早期和原始特征。腎小管上皮細(xì)胞損傷可導(dǎo)致腎小管重吸收和分泌功能異常，促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞萎縮及腎間質(zhì)纖維化。最近研究證實(shí)肌醇耗竭在糖尿病腎病腎小管間質(zhì)損傷的過程中起著重要的作用，而腎臟特異性表達(dá)的肌醇加氧酶(Myo-inositol oxygenase，MIOX)主要表達(dá)在腎組織腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)，是組織中肌醇代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶。體外實(shí)驗(yàn)表明高葡萄刺激可上調(diào)腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)肌醇加氧酶的表達(dá)，并產(chǎn)生促進(jìn)

4、活性氧(reactive oxygen species， ROS)生成及纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)表達(dá)的效應(yīng)?；谝陨戏治?，我們認(rèn)為MIOX在糖尿病腎病患者腎組織內(nèi)表達(dá)上調(diào)，并可能與糖尿病腎病腎小管上皮細(xì)胞氧化損傷及間質(zhì)纖維化密切相關(guān)。故本試驗(yàn)中我們通過檢測(cè)MIOX在糖尿病腎病患者腎活檢組織及血液、尿液中的表達(dá)，并分析其余臨床指標(biāo)之間的相關(guān)性，旨在為進(jìn)一步研究糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制及治療提供新的思路與靶點(diǎn)。
　　第

5、一章糖尿病腎病患者腎組織中MIOX的表達(dá)及其與臨床指標(biāo)相關(guān)性分析
　　目的:觀察MIOX在糖尿病腎病患者腎組織中的表達(dá)，并分析其與臨床各指標(biāo)之間的關(guān)系。
　　方法:隨機(jī)選取經(jīng)臨床和腎臟病理活檢確診為糖尿病腎病的患者15人及輕微病變的患者（原發(fā)性腎?。?5人。采用HE，PASM，Masson，PAS染色觀察腎臟病理改變，免疫組化、免疫熒光檢測(cè)MIOX表達(dá)病變，并使用SPSS17.0分析糖尿病腎病患者腎組織內(nèi)MIOX相對(duì)表達(dá)程度

6、與臨床指標(biāo)間的相關(guān)性。
　　結(jié)果:腎臟病理顯示糖尿病腎病患者腎活檢組織腎小球體積增大，部分出現(xiàn)結(jié)節(jié)性腎小球硬化，出現(xiàn)典型的Kimmelstiel-Wilson結(jié)節(jié)，腎小球系膜基質(zhì)的增生，基底膜的增厚、僵硬;腎小管片狀萎縮并部分代償性擴(kuò)張，腎間質(zhì)的片狀纖維化改變。而對(duì)照組為輕微病變患者，腎小球部分基本正常，系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)都無明顯增生，腎小管間質(zhì)無明顯纖維化，血管無明顯異常。糖尿病腎病患者的腎小管間質(zhì)損傷評(píng)分明顯比對(duì)照組高。免疫組

7、化實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:MIOX主要表達(dá)在腎小管上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)。免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果提示:MIOX主要表達(dá)在腎小管上皮細(xì)胞的胞漿及腎間質(zhì)內(nèi)。與非糖尿病腎病輕微病變相比，糖尿病腎病患者腎小管細(xì)胞內(nèi)MIOX表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.05)。相關(guān)性分析表明MIOX表達(dá)強(qiáng)度與糖尿病腎病患者腎小管間質(zhì)損傷評(píng)分、血清肌酐、血糖、糖化血紅蛋白水平呈正相關(guān)。
　　結(jié)論:糖尿病腎病患者腎組織MIOX表達(dá)水平明顯上升，MIOX可能參與糖尿病腎病腎小管間質(zhì)損傷。

8、>　　第二章糖尿病腎病患者血液及尿液中MIOX的表達(dá)及其與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析
　　目的:觀察糖尿病腎病患者血清及尿液中MIOX的表達(dá)，分析其與臨床指標(biāo)的關(guān)系。
　　方法:隨機(jī)選取臨床診斷為糖尿病腎病患者30人，非糖尿病腎病慢性腎臟疾病患者30人，單純糖尿病患者30人，正常對(duì)照組30人。采用ELISA法檢測(cè)外周血及尿液中間的MIOX表達(dá)。
　　結(jié)果:MIOX檢測(cè)結(jié)果顯示:糖尿病腎病組，非糖尿病腎病組，糖尿病組，及正常對(duì)

9、照組血清MIOX的水平分別為:2050.4±160.7、1069.2±96.23、619.3±64.1、49.47±3.3pg/ml。糖尿病腎病組，非糖尿病腎病組，糖尿病組，及正常對(duì)照組尿液MIOX的水平分別為:2675.3±241.1、1427.2±146.3、775.0±80.3、73.5±4.8pg/ml。糖尿病腎病患者血，尿MIOX水平明顯高于非糖尿病腎病組、單純糖尿病患者組及正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.01)，相關(guān)