左旋四氫巴馬汀在大鼠全腦缺血再灌時(shí)對(duì)核因子-κB及相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過檢測(cè)大鼠全腦缺血再灌注時(shí)海馬CA1區(qū)核因子-κ B(NF-κ B)、抑制蛋白(IκBα)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素(IL-1β、IL-10)的表達(dá)以及凋亡細(xì)胞數(shù)目的變化,探討NF-κ B在全腦缺血再灌注損傷中的作用以及左旋四氫巴馬汀(L-tetrahydropalmatine,L-THP)對(duì)全腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用機(jī)制.方法:采用Pulsinelli阻塞四血管的方法建立大鼠全腦缺血再灌注損傷模型.試驗(yàn)分三組:假手

2、術(shù)組(S組),全腦缺血再灌注生理鹽水組(IR組),全腦缺血再灌注左旋四氫巴馬汀治療組(T組).每組按再灌注時(shí)間的不同,分2h、6h、12h、24h和48h五個(gè)亞組,每個(gè)亞組各五只健康雌雄不拘的Wistar大鼠.T組于再灌注時(shí)及以后每間隔6h給予等量的左旋四氫巴馬汀注射液(0.5ml/kg,15mg/kg)腹腔內(nèi)注射(ip.),IR組于再灌注時(shí)及以后每間隔6h給予等容量的生理鹽水(0.5ml/kg)腹腔內(nèi)注射.NF-κB、IκBα采用免疫

3、組織化學(xué)方法(鏈霉親合數(shù)(StreptAvidin)-生物素(Biotin)-酶復(fù)合物(Enzyme Complex)法-SABC法)檢測(cè),TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-10 mRNA采用原位雜交組織化學(xué)方法(in situ hybridization histochemistry,ISHH)進(jìn)行檢測(cè),并用圖像分析系統(tǒng)計(jì)算陽性細(xì)胞的吸光度值(A);凋亡細(xì)胞數(shù)目用原位末端標(biāo)記法(in situ end labeling t

4、echnique,TUNEL)檢測(cè),光鏡下計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞數(shù)目.結(jié)論:1.NF-κ B、TNF-αmRNA和IL-1βmRNA參與了全腦缺血再灌注損傷;IL-10可能對(duì)全腦缺血再灌損傷有保護(hù)作用.2.NF-κ B的激活介導(dǎo)了TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表達(dá),在腦缺血再灌注的炎癥反應(yīng)中可能處于中心環(huán)節(jié);NF-κB的激活對(duì)IL-10 mRNA的表達(dá)無影響.3.左旋四氫巴馬汀可通過減少IκBα的降解,抑制NF-κB、TNF-αmRNA