橋粒芯糖蛋白1（DSG1）在口腔粘膜白斑和口腔鱗癌中的表達(dá).pdf

1、口腔白斑(oralleukoplakia，OLK)是指“是口腔黏膜上以白色為主的損害，不具有其他任何可定義的損害特征；一部分口腔白斑可轉(zhuǎn)化為癌”?？谇徽衬ど掀ぎ惓Ｔ錾强谇徽衬ぐ┣安∽兊囊粋€最基本特征，是上皮由正常狀態(tài)向惡性轉(zhuǎn)化的過渡階段。由OLK向口腔鱗癌(oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)的發(fā)展過程是多階段、多步驟的。大量的研究表明其轉(zhuǎn)變是一個受多因素影響的復(fù)雜過程。近來研究發(fā)現(xiàn)橋粒在腫瘤中的表達(dá)減少，尤

2、其是在惡性腫瘤中基本不表達(dá)，橋粒在組織的惡變及腫瘤的轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了一定作用。本研究通過免疫組化技術(shù)檢測口腔正常粘膜、口腔白斑、口腔鱗癌及體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞中橋粒芯糖蛋白1(desmogleinl，DSG1)的表達(dá)，以研究橋粒的變化規(guī)律，探討其在癌變過程中的意義。 目的： 探討橋粒在口腔粘膜癌變過程中的表達(dá)及意義，并且探討口腔白斑癌變機(jī)制。 方法： 1.口腔正常上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液中鈣粒子濃度，免疫組

3、化S-P法檢測橋粒芯糖蛋白1(DSG1)的表達(dá)。口腔白斑成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)：組織塊法培養(yǎng)白斑成纖維細(xì)胞，繪制生長曲線，MTT法比較正常成纖維細(xì)胞與白斑成纖維細(xì)胞的生物學(xué)活力，免疫組化法檢測角蛋白、波形蛋白表達(dá)。 2.口腔舌癌上皮細(xì)胞(Tca-8113)與口腔正常成纖維細(xì)胞、口腔白斑成纖維細(xì)胞在相同條件下混和培養(yǎng)3天，S-P法檢測橋粒芯糖蛋白1(DSG1)的表達(dá)。 3.通過免疫組化S-P法檢測來自山東大學(xué)口腔醫(yī)院病理科199

4、5-2002石蠟標(biāo)本，包括正?？谇徽衬?0例，OLK35例(其中單純增生17例，輕度異常增生9例，中度異常增生6例，重度異常增生3例)，OSCC30例(其中Ⅰ級12例，Ⅱ級10例，Ⅲ級8例)中橋粒芯糖蛋白1(DSG1)的表達(dá)，并對免疫組化染色的OD值測量，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。 4.透射電鏡觀察橋粒在口腔癌變過程中的變化。 結(jié)果： 1.細(xì)胞培養(yǎng)：成功的培養(yǎng)了口腔粘膜正常上皮細(xì)胞及口腔白斑成纖維細(xì)胞?？谇话装叱衫w維細(xì)胞生

5、長速度、分裂增殖能力及存活能力均較正常成纖維細(xì)胞(normalfibroblast,NFS)明顯增強(qiáng)(p＜0.05)?？谇话装叱衫w維細(xì)胞的細(xì)胞角蛋白免疫組化染色呈陰性，波形蛋白染色呈陽性。 2.免疫組化結(jié)果：正?？谇火つぶ蠨SG1表達(dá)陽性率為100％；口腔白斑單純增生組DSG1表達(dá)陽性率為94.1％；口腔白斑不典型增生組DSG1表達(dá)陽性率27.8％；口腔鱗癌組陽性率為13.3％。當(dāng)鈣離子濃度在1.0mM時體外培養(yǎng)的正?？谇徽衬ど?/p>

6、皮細(xì)胞呈陽性染色。當(dāng)鈣離子濃度在1.0mM時，Tca-8113細(xì)胞未見陽性表達(dá)，Tca-8113細(xì)胞與正常成纖維細(xì)胞混合培養(yǎng)組亦未見陽性表達(dá)，Tca-8113細(xì)胞與口腔白斑成纖維細(xì)胞混合培養(yǎng)組見陽性表達(dá)。 3.平均光密度(OD)：正常口腔粘膜組、單純增生白斑組、不典型增生白斑組、口腔鱗癌組平均光密度依次減小，組間兩兩比較有顯著差異性(p＜0.05)。口腔鱗癌中不同分化的癌組織中平均光密度值亦依次減小，組間兩兩比較有顯著差異性(p

7、＜0.05)。 4.電鏡結(jié)果：正常口腔粘膜上皮中可見兩細(xì)胞間有大量的橋粒連接，大量與橋粒連接的張力細(xì)絲排列整齊，胞核無明顯變化。癌變口腔粘膜中橋粒結(jié)構(gòu)被破壞，與橋粒連接的張力細(xì)絲收縮呈球狀，排列紊亂，橋粒的正常結(jié)構(gòu)被破壞，胞核呈蠶食狀。 結(jié)論： 本研究發(fā)現(xiàn)橋粒在口腔白斑中表達(dá)減少，尤其在不典型增生白斑中，同樣在口腔鱗癌中表達(dá)減少，而在低分化鱗癌中基本無表達(dá)。這提示橋粒在口腔癌變的發(fā)生發(fā)展過程中具有一定的意義，為臨