三七總皂苷口服腸溶制劑的研究.pdf

1、本課題以廣泛應(yīng)用于臨床，對心血管疾病等有顯著療效的血栓通注射液中的三七提取物一三七總皂苷(Panax notoginseng saponins，PNS)為模型藥物，以生物藥劑學(xué)和藥物動力學(xué)理論為指導(dǎo)，研究其吸收機(jī)理和能夠避開胃酸及酶破壞的腸溶口服制劑。
　　論文第一部分，建立了HPLC-UV測定PNS中指標(biāo)性成分的體內(nèi)外分析方法，其靈敏度高，分離度和重現(xiàn)性好，可以滿足本研究體內(nèi)外樣品分析要求。測定了PNS中活性單體三七皂苷R1(R

2、1)、人參皂苷Rb1(Rb1)和人參皂苷Rg1(Rg1)的百分含量，分別為9.64％、36.38％和51.10％。系統(tǒng)考察了PNS的理化性質(zhì)和初步穩(wěn)定性。采用正辛醇一水系統(tǒng)測定了不同pH值條件下PNS中R1、Rb1和Rg1的表觀油水分配系數(shù)(Papp)，同時考察了pH值、溫度、光照和濕度對PNS中三種單體的影響。結(jié)果顯示PNS水溶液呈弱酸性，生理pH環(huán)境下R1和Rb1的Papp均在1～2之間，Rg1的Papp在5～8之間。三種單體對光照

3、和濕度較敏感，在中性及弱堿性條件下相對穩(wěn)定，在酸性環(huán)境中迅速降解。
　　論文第二部分，建立了適用于PNS吸收機(jī)理研究的大鼠在體灌注模型，系統(tǒng)地研究了PNS主要成分在小腸的吸收動力學(xué)，并且考察了常用吸收促進(jìn)劑對其吸收的影響。結(jié)果顯示，在40.084～400.840μg·mL-1這個濃度范圍內(nèi)，不同的藥物濃度對PNS在大鼠小腸全段的吸收無顯著影響，PNS主要成分水溶性好，透膜性差，吸收機(jī)制主要為被動擴(kuò)散，同時有細(xì)胞旁路轉(zhuǎn)運，存在外排泵

4、消除可能。PNS主要成分口服生物利用度低，透膜吸收是限速過程，與冰片、卡波姆或吐溫80聯(lián)合使用，大鼠小腸吸收速率提高明顯，可能與它們能促進(jìn)細(xì)胞旁路轉(zhuǎn)運或降低藥物外排泵的作用有關(guān)。
　　論文第三部分，在對PNS吸收機(jī)理及藥動學(xué)進(jìn)行了初步研究的基礎(chǔ)上，以PNS為模型藥物，對其普通腸溶膠囊、腸溶微囊（膠囊）和腸溶微丸（膠囊）三種不同腸溶制劑的制備工藝、制劑學(xué)性質(zhì)、體外釋藥規(guī)律和穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。按正交設(shè)計方法得到的最優(yōu)處方分別制備了三批

5、PNS腸溶膠囊樣品，f2因子評價結(jié)果表明，三種腸溶膠囊的三批樣品的釋放度均有良好的重現(xiàn)性，R1、Rb1和Rg1的釋放行為沒有顯著性差異，只需要監(jiān)測一種指標(biāo)成分即可對PNS各主要成分的釋放進(jìn)行評價，并最終選擇Rg1為體外釋放度監(jiān)測對象。采用單指數(shù)模型、Weibull模型、Higuchi模型、Ritger-Peppas模型、零級釋放、一級釋放、Hixcon Crowell模型和Niebergull模型對累積釋放度數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，普通腸溶膠囊、

6、腸溶微囊（膠囊）和腸溶微丸（膠囊）的最佳擬合模型分別為:Hixcon Crowell模型、Weibull模型和Weibull模型。參照中國藥典2010版二部附錄XIX C“藥物穩(wěn)定性試驗指導(dǎo)原則”，對三種PNS腸溶膠囊的穩(wěn)定性進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明，所考察膠囊完整，無軟化塌陷現(xiàn)象，內(nèi)容物色澤變化不大;釋放度、含量和水分考察均符合要求。
　　論文第四部分，考察了PNS在大鼠體內(nèi)及三種PNS腸溶膠囊在Beagle犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)及

7、口服生物利用度。本部分創(chuàng)新性地應(yīng)用中藥多組分整合藥代動力學(xué)研究新理論，在求得R1、Rb1和Rg1藥動學(xué)參數(shù)后，利用各成分曲線下面積(AUC0→∞)百分率作為自定義權(quán)重系數(shù)，計算PNS動物體內(nèi)綜合血藥濃度并建立整合藥動學(xué)研究模型，進(jìn)一步估算PNS動物體內(nèi)整合藥動學(xué)參數(shù)，使得所獲參數(shù)能夠最大程度上表征中藥的整體處置規(guī)律，為建立符合中醫(yī)藥特點的中藥藥代動力學(xué)研究提供了一種新的研究思路與技術(shù)方法。結(jié)果表明PNS靜脈注射及灌胃后，R1、Rb1和R

8、g1在大鼠體內(nèi)的藥時曲線均符合二室模型，經(jīng)過劑量校正后的口服絕對生物利用度分別為1.76％、0.78％和2.44％。分別以市售注射用血栓通（凍干）和市售血栓通膠囊為參比制劑進(jìn)行了自制PNS腸溶膠囊的藥動學(xué)和生物利用度初步研究。實驗結(jié)果表明:單劑量給予Beagle犬供試品和參比制劑后，PNS腸溶膠囊與普通制劑相比，生物利用度提高1.08～5.71倍，有顯著性差異，MRT延長，絕對生物利用度也有不同程度提高。采用Wagner-Nelson(

9、W-N)法對自制腸溶膠囊的體內(nèi)外相關(guān)性進(jìn)行評價，結(jié)果表明，各制劑的各成分的體內(nèi)外相關(guān)性結(jié)果不一，其原因可能是PNS的吸收過程不僅僅是被動擴(kuò)散，還包括主動轉(zhuǎn)運過程。體內(nèi)實驗結(jié)果進(jìn)一步證明各腸溶制劑效果確切，達(dá)到了課題預(yù)期設(shè)計的目的。
　　本課題在生物藥劑學(xué)和藥物動力學(xué)理論的指導(dǎo)下，以PNS的胃腸道吸收特性為基礎(chǔ)進(jìn)行制劑研制，減少了制劑開發(fā)的盲目性。本課題的研究結(jié)果為今后PNS其它劑型設(shè)計的處方工藝、質(zhì)量評價、穩(wěn)定性、體內(nèi)動力學(xué)等方面