脈沖電磁場對糖尿病大鼠急性下肢缺血血管再生作用的實驗研究.pdf

1、研究背景：
　　糖尿病導致的下肢缺血是缺血性疾病中的常見癥狀，具有發(fā)生率高、致殘率高及病死率高等特點，嚴重的影響人們的生活質量，成為社會經(jīng)濟發(fā)展的沉重負擔。對于缺血性疾病，治療性血管性新生是當前的研究熱點。治療性血管新生主要包括包括干細胞移植、直接注射重組成血管因子的蛋白療法和基于傳遞編碼成血管因子基因的基因療法。這些方法在缺血性疾病中取得了一定的療效,但是其價格昂貴,技術要求高,對具有龐大患病人群但醫(yī)療資源相對十分缺乏的我國難以

2、普遍推廣。隨著脈沖電磁場的發(fā)展,在臨床中廣泛應用于促進骨愈合、治療腫瘤和一些神經(jīng)損傷性疾病,取得了較好的療效，在實驗研究方面，已發(fā)現(xiàn)脈沖電磁場可促進內皮細胞增殖、加快血管化的作用，因此，本實驗研究脈沖電磁場對糖尿病大鼠急性缺血下肢血管再生的影響。
　　研究目的：
　　1.建立糖尿病大鼠急性下肢缺血模型，對實驗組大鼠給予脈沖電磁場處照組（P<0.05），而術后當天及術后7天，實驗組與對照組的血流恢復無明顯差異（P＞0.05）。

3、
　　2.免疫組化染色結果顯示：術后7、14、28天，實驗組CD31的表達分別為430.2±18.15/mm2，677.4±15.63/mm2，837.2±25.60/mm2；而對照組為357.8±26.64/mm2，495.2±25.31/mm2，619.4±19.24/mm2。實驗組術后14、28天明顯高于對照組（P<0.05），而術后7天兩組無顯著性差異（P＞0.05）。實驗組α-SMA的表達在7、14、28天分別為22.6

4、±1.91/mm2，35.8±2.08/mm2和50.6±3.08/mm2；對照組為18.2±1.07/mm2，25.6±1.94/mm2和32.4±1.72/mm2，兩組α-SMA的表達對比結果與CD31一致。
　　3.免疫熒光染色可見:術后7、14、28天，實驗組RECA-1表達分別為：96.4±4.00/mm2，179.8±6.95/mm2，253.0±8.67/mm2；對照組為89.6±4.51/mm2，150.4±5.3

5、5/mm2，184.6±6.09/mm2；實驗組在14、28天時明顯高于對照組（P<0.05）；而7天時兩者差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　4.VEGF、FGF-2及其受體檢測結果：實驗組7、14、28天等不同時間點VEGF的ELISA檢測值分別為38.6±6.27pg/ml，91.4±10.51pg/ml，59.8±6.48pg/ml；對照組為40.4±5.83pg/ml，80.4±10.88pg/ml，51.6±2.9

6、0pg/ml；兩組相比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），Western blot的結果與ELISA一致。實驗組FGF-2的ELISA檢測值在各個時間段內分別為13.4±1.91pg/ml，28.4±3.67pg/ml，47.4±6.80pg/ml；對照組分別為：7.6±1.21pg/ml，11.8±1.53pg/ml，10.8±2.17pg/ml，在各個時間點實驗組明顯高于對照組（P<0.05），Western的結果與之一致。同時Wes

7、tern對VEGF受體VEGFR2檢測，未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計學意義（P>0.05），而對FGF-2受體FGFR1檢測，我們發(fā)現(xiàn)，實驗組在各個階段明顯高于對照組（P<0.05）。
　　5.P-ERK1/2、T-ERK1/2、P-P38、T-P38檢測結果通過Western blot方法檢查，實驗組P-ERK1/2與T-ERK1/2比值在各個時間段均高于對照組（P<0.05）,而兩組P-P38與T-P38比值無顯著性差異(P>0.05)。