脈沖電磁場對去勢大鼠骨代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的:PEMF在體外對成骨細(xì)胞一破骨細(xì)胞體系的作用及其機(jī)理,探討PEMF對發(fā)生骨質(zhì)疏松的去勢大鼠骨的生物學(xué)作用,為臨床應(yīng)用PEMF治療和預(yù)防骨質(zhì)疏松提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).材料與方法:1.應(yīng)用形態(tài)學(xué)、特異性酶染色及免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù),對培養(yǎng)的成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定.2.應(yīng)用對硝基苯酚法測定在PEMF作用后的成骨細(xì)胞-破骨細(xì)胞共育體系中成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性(ALPase);應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測PEMF對成骨細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響;應(yīng)用圖

2、象分析技術(shù)分析PEMF對成骨細(xì)胞礦化功能的影響.3.通過熒光標(biāo)記,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測PEMF對成骨細(xì)胞細(xì)胞膜電位及細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響.4.通過H-E染色、四環(huán)素標(biāo)記和Ⅰ型膠原SABC法免疫組化技術(shù)分析處理組和對照組組織學(xué)的改變;通過圖象重組分析技術(shù)檢測各組骨小梁空間結(jié)構(gòu)的變化.5.通過骨密度儀檢測各組骨密度的變化;通過生物力學(xué)測試儀檢測各組生物力學(xué)的變化.6.統(tǒng)計分析:采用SPSS 10.0 軟件包.計量資料,采用配對t檢驗(yàn)及方差分

3、析檢驗(yàn)各組間差異的顯著性,組間比較用LSD方法;計數(shù)資料,卡方檢驗(yàn).結(jié)論:1.在一定頻率和強(qiáng)度PEMF的作用下,成骨細(xì)胞DNA合成增加,細(xì)胞增殖加快,合成和分泌細(xì)胞外有機(jī)質(zhì)功能增加,后者與細(xì)胞外鈣等無機(jī)質(zhì)結(jié)合,從而促進(jìn)鈣化結(jié)節(jié)的形成.2.PEMF通過作用于成骨細(xì)胞膜上的鈉通道,使得細(xì)胞內(nèi)鈉離子內(nèi)流而出現(xiàn)去極化,當(dāng)去極化達(dá)到一定的水平時,細(xì)胞膜上的電壓依賴型鈣離子通道開放,從而細(xì)胞外鈣離子得以向細(xì)胞內(nèi)內(nèi)流,最終表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高,