分子生物學方法在鑒別魚糜制品原料魚種中的應用.pdf

1、隨著我國水產加工業(yè)的發(fā)展，特別是魚糜制品產量的不斷增加，水產加工原料的品質控制變得尤為重要。為了保護某些種群，確保食品生產嚴格遵照規(guī)范進行，同時避免假冒現象，保護消費者權益，水產制品中魚種的鑒別已經成為消費者和質量檢測部門共同關注的熱點。 鑒于魚糜制品水產加工程度較高，經各工序如高溫、切割、添加調料和色素等處理后，已很難通過形態(tài)、味覺等常規(guī)感官鑒定方法對其魚種進行準確的辨別，而對于食品中原料成分的鑒定，我國至今還缺乏相關的檢測標

2、準。因此，必須盡快摸索建立一條有效、實用的魚種鑒定技術。 本文探索了利，用分子生物學技術來檢測魚糜制品中原料魚種，通過PCR(聚合酶鏈式反應)方法，對水產品mt-DNA中的16SrRNA基因片段進行測序，對魚種進行鑒別。本文先對新鮮的活魚通過上面的方法進行了鑒定，通過比對，發(fā)現實驗所得序列與基因庫中的序列相吻合，說明該法用于魚種鑒別是可行的。然后以食品學院自制的白鰱魚丸及超市購買回來的含有兩種組分的鱈魚丸、章魚餅和國外蟹柳作為原

3、料，采用普通酚-氯仿抽提法進行基因組DNA提取、選用16SrRNA基因作為目的基因，利用16Sar(L2510)CGCCTGTTTATCAAAAACAT和16Sbr(H3080)CCGGTCTGAACTCAGATCACGT兩條序列作為引物，對16S rRNA進行：PCR擴增、克隆、測序，從而獲得原料產品的16S rRNA基因部分片段序列，通過運用BLAST。軟件，將16S rRNA部分片段序列和Genbank中更多的序列進行比較，找到相

4、似性最高的序列，根據同源性理論，做出魚種鑒定。 通過實驗，本文確立了魚糜制品基因組DNA的提取方法、優(yōu)化了PCR擴增反應體系、PCR擴增反應條件。對最終測序獲得的16S rRNA基因部分片段序列，運用clustwal w軟件進行序列比對時發(fā)現：自制白鰱魚丸的16S rRNA基因部分片段序列與白鰱肌肉的保持一致。而對于超市買回的魚糜制品(含有豬肉和魚糜)，運用BLAST軟件，將獲得的序列與Genbank中的序列進行同源性比較時，結