β受體阻滯劑誘導增殖期血管瘤凋亡的研究.pdf

1、研究一血管瘤病理分期的年齡分布及普萘洛爾的療效觀察
　　目的:通過比對血管瘤各期病理結構與年齡分布的差異，以及普萘洛爾對血管瘤的療效觀察。探討血管瘤病理分期與年齡分布的關系，評價口服普萘洛爾對血管瘤的治療效果。
　　方法:
　　1.收集天津市兒童醫(yī)院外科2009年1月至2011年1月手術切除的血管瘤組織蠟塊80例。予組織行HE染色，按染色結果分析血管瘤病理分期與患兒年齡分布的關系。
　　2.收集天津市兒童醫(yī)院整形

2、外科2010年1月至2013年1月收治的嬰兒血管瘤121例，其中男48例，女73例?；仡櫺苑治隹诜蛰谅鍫枌ρ芰龅闹委熜Ч?。
　　結果:
　　1.HE染色結果可見:血管瘤增殖期主要分布于（0～1歲）患兒，消退期主要分布（1～5歲）患兒，消退完成期主要分布于（5～11歲）患兒。(P＜0.05，差異有統計學意義)。
　　2.療效觀察:所有患兒服藥后48小時以內均可見瘤體不同程度減小，張力下降，顏色變淺，服藥1周之內變化較

3、為顯著。隨訪3-5個月療效評定:Ⅳ級主要為（0～1歲）患兒，Ⅲ級主要為（1～2歲）患兒，Ⅱ級主要為（2～3歲）患兒，Ⅰ級主要為（3～5歲）患兒。（P＜0.05，差異有統計學意義）。
　　結論:
　　1.血管瘤增殖期處于0～1歲，隨后進入消退期及消退完成期。
　　2.普萘洛爾對增殖期血管瘤療效顯著，對非增殖期血管瘤療效不佳。
　　3.普萘洛爾對增殖期細胞有抑制作用，然而其作用機制目前尚不清楚。
　　4.普萘洛

4、爾為β受體阻滯劑，其對增殖期細胞的抑制作用是通過β1受體還是β2受體，亦或是兩種β受體同時受抑制有待進一步的研究。
　　研究二β受體阻滯劑對血管內皮細胞增殖的影響
　　目的:通過比對三種β受體阻滯劑:選擇性β1受體阻滯劑美托洛爾、廣譜β受體阻滯劑普萘洛爾、選擇性β2受體阻滯劑丁氧胺分別對增殖期HUVEC的作用差異，探索β受體阻滯劑是通過阻滯β1受體還是β2受體，抑或是二者同時，抑制血管內皮細胞的增殖。
　　方法:

5、>　　1.培養(yǎng)、鑒定人臍靜脈血管內皮細胞
　　2.采用MTT法檢測濃度為20μg/ml的三種β受體阻滯劑:美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺對HUVEC細胞株增殖的影響。比對三種藥物組間細胞活性抑制率的差異。
　　3.采用ELISA法檢測濃度為20μg/ml三種β受體阻滯劑:美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺對HUVEC細胞株VEGF、MMP-9濃度的影響。比較VEGF、MMP-9的濃度在三組間的差異。
　　結果:
　　1.經鑒

6、定所培養(yǎng)的細胞為HUVEC。
　　2.MMT結果顯示:HUVEC經三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺作用24后，均可抑制血管內皮細胞的增殖，美托洛爾組細胞活性抑制率為20.06％±0.051，普萘洛爾組細胞活性抑制率為48.07％±0.029，丁氧胺組細胞活性抑制率為35.69％±0.046。三種藥物組間比較，普萘洛爾組細胞抑制率較丁氧胺組增加;丁氧胺組細胞抑制率較美托洛爾組增加。(P＜0.05，差異具有統計學意義)。

7、r>　　3.ELISA結果顯示:HUVEC經正常培養(yǎng)基和三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺作用24小時后，VEGF在對照組濃度為58.073±3.351 pg/ml，美托洛爾組為54.291±1.082pg/ml，普萘洛爾組濃度為49.448±1.041pg/ml，丁氧胺組濃度為51.916±1.626pg/ml。MMP-9在對照組濃度為0.253±0.026ng/ml，美托洛爾組為0.129±0.022ng/ml，普萘洛爾組濃

8、度為0.026±0.016ng/ml，丁氧胺組濃度為0.054±0.009ng/ml。與對照組相比較，三種藥物組的VEGF、MMP-9濃度均下降。其中，普萘洛爾組較丁氧胺組的VEGF、MMP-9濃度下降明顯，丁氧胺組較美托洛爾組下降明顯。（P＜0.05，差異具有統計學差異）。
　　結論:
　　1.三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺均可以抑制臍靜脈血管內皮細胞的增殖。
　　2.三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、

9、丁氧胺均可以降低臍靜脈血管內皮細胞VEGF、MMP-9的濃度。
　　3.β受體阻滯劑對血管內皮細胞的增殖抑制作用由β1、β2受體共同起作用，且β2受體的作用比β1受體更強。
　　研究三β受體阻滯劑誘導HUVEC凋亡的研究
　　目的:通過比對三種β受體阻滯劑:選擇性β1受體阻滯劑美托洛爾、廣譜β受體阻滯劑普萘洛爾、選擇性β2受體阻滯劑丁氧胺分別對增殖期HUVEC早期凋亡率的作用差異，探索β受體阻滯劑是通過阻滯β1受體還是

10、β2受體，抑或是二者同時，誘導血管內皮細胞凋亡。旨在初步探討β受體阻滯劑治療血管瘤的作用機制。
　　方法:
　　1.傳代培養(yǎng)人臍靜脈血管內皮細胞，選擇3-6代對數生長期細胞進行實驗。
　　2.運用流式細胞儀檢測濃度為20μg/ml的三種β受體阻滯劑:美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺對HUVEC細胞株早期凋亡率的影響。
　　結果:
　　1.人臍靜脈血管內皮細胞生長良好，24-48小時即可傳代一次。
　　2.流

11、式細胞儀檢測結果顯示:HUVEC經正常培養(yǎng)基及三種β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾、丁氧胺作用24后，對照組細胞凋亡率為9.41％±0.53，美托洛爾組細胞凋亡率為12.44％±0.24，普萘洛爾組細胞凋亡率為27.14％±0.56，丁氧胺組細胞凋亡率為18.82％±0.91。與對照組相比較，三種藥物組細胞早期凋亡率均有所增加，萘洛爾組細胞的凋亡率高于丁氧胺組;丁氧胺組凋亡率高于美托洛爾組。（P＜0.05，差異具有統計學意義）。