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1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)菌氨肽酶的產(chǎn)酶條件優(yōu)化及應(yīng)用研究姓名:魏亞娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):發(fā)酵工程指導(dǎo)教師:田亞平20080301AbstractAbstractThesolubilitythethermostabilityandthenutritionofproteinareobviouslyimprovedafterhydrolysised,butitshydrolysategenerallyappearedbitterandwas
2、limitedinapplicationoffoodAminopeptidasesCanbedebitteringexopeptidasesthatselectivelyreleaseN—terminalhydrophobicaminoacidresiduesfrombitterpolypeptidesInthispaperthefermentationconditions,theenzymepropertiesandtheapplic
3、ationinSPlwereinvestigatedOptimizationsofthefermentationconditionwascardedoutasfollows:Cornstarch409/L,Soybeandregs309/L,K2HP0432169/L,KH2P0400749/LMgS047H2003g/L,NaCI1∥L,COCl2lmL(O1mol/L),temperature40。C,rotatespeed200r
4、/min,pH75,inoculumsize8%,volume20mL/250mLTheaminopeptidaseactivitywas26856U/mLafteroptimization,whichincreased171timesTheoptimumconditionswereinvestigatedonaminopeptidasein7Ljarfermentorwereanalyzed,theaminopeptidaseacti
5、vityreached1200U/mLAsforaminopeptidaseproducedbyBacillussubtisZj016afteroptimization,thepurificationprocedureofethanolfractionation(20%。40%)wasstudiedonTheactivitywasoptimalatpH85and550CThetemperaturestabilitywas2070(2an
6、dthepHstabilitywas80“100Whileinhibitedbythegelatinandotherchemicals,theenzymeactivitywasnotsignificantlyinfluencedbyGlycerolandpeptoneInhibitedbyseveraldivalentcations(Zn2、Ni2)andEDTAActivatedbyC02111eactivationregionoft
7、heenzymeseemedtohadtwoZn2,andeachsubunithadoneKmoftheaminopeptidaseWasO53mmol/Land‰觚Was19231tmol/L/minThelimitedhydrolysisoptimumconditionsofSPIbyaminopeptidaseandbasicproteaseWasstudiedasfollows:hydrolyzingtemperature50
8、℃,pH85,ratiosofbothenzymes/substrate10000U/g,concentrationofsubstrate609/L,totalhydrolysistime4h,hydrolysisdegreeofprotein25O%anditshydrolysisproductisafewbitterThecomparisonsofbittervalue,distributionofmolecularweight,h
9、ydrophobicvalueandfreeaminoacidbetweenthehydrolysisproductbythesynergetichydrolysisandthehydrolysisproductbybasicprotease:theirtypesofelutionanddistributionandproportionofmolecularweightweredifferentthefomerWaslessthanth
10、elatterinthehydrophobicvalueandasforfreeamnioacid,thefomerwas1610mg/L,andthelaRerwas1250mg/LKeywords:aminopeptidase;Bacillus;fermentationconditionsoptimization;enzymeproperties;soybearlproteinisolate;hydrolysis;debitteri
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