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文檔簡介
1、分類號:R7357密級:學位類別:科學學位團專業(yè)學位口學校代碼:10062學號:2010602782學科門類:醫(yī)學天坪眚斜矢粵碩士學位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目:小類泛素化修飾在肝癌多藥耐藥中相關性的初步研究TITLEPreliminarystudyabouttheeffectofSUMOylationonMDRinhepatocellularcarcinoma一級學科:臨床醫(yī)學二級學科:臨床檢驗診斷學論文作者
2、:尹美琳指導教師:劉運德導師教師:鮑會靜天津醫(yī)科大學研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要目的原發(fā)性肝癌(HCC)是全球六大惡性腫瘤之一,在男性常見惡性腫瘤中位居第三,在女性中位居第八。肝癌具有多血管、惡性程度高、生長速度快、轉移范圍廣和復發(fā)率高等特點,臨床治療效果不理想,術后常需進行輔助性化療,但由于肝癌化療常產(chǎn)生多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)現(xiàn)象,嚴重阻礙了化療的效果。在已知與MDR相關的
3、蛋白中,已經(jīng)確定SUMOylation是c—Jun、P53及HIF1等蛋白翻譯后重要的修飾形式,影響其生理生化功能。SUMOylation在肝癌MDR的形成中可能起著特定的作用。在肝癌產(chǎn)生MDR過程中,某些蛋白的SUMOylation狀態(tài)可能發(fā)生改變,進而生理功能發(fā)生變化,使其對化療藥物抵抗性增加。本實驗初步研究SUMOylation在肝癌耐藥中發(fā)揮的作用及發(fā)生SUMOylation的途徑。方法1通過免疫組化方法檢測癌組織與癌旁組織中小
4、類泛素化修飾肽SUMO一1的表達。2利用五氟尿嘧啶(5FU)進行誘導建立5FU耐藥細胞系。通過比較肝癌細胞與5FU耐藥細胞系細胞的形態(tài),增殖能力,以及對其他化療藥物的敏感程度,最終證明我們是否得到了穩(wěn)定的肝癌多藥耐藥(MDR)細胞模型HepG2/R。3通過WesternBlot方法進一步比較人肝癌細胞與人肝癌多藥耐藥細胞模型中SUMO1蛋白以及SUMOylation過程中各種酶的變化,來確定肝癌耐藥是否與SUMOylation有關及這種
5、現(xiàn)象又是通過何種途徑產(chǎn)生。毒士甲當日木1免疫組化試驗結果顯示,20例癌組織樣本的胞質與胞核內(nèi)SUMO1均高表達,而癌旁組織不表達或低表達。2歷經(jīng)1年時間利用5FU誘導成功建立了肝癌多藥耐藥細胞模型(HepG2/R)。HepG2/R與HepG2形態(tài)上存在差異,HepG2/R有偽足伸出。兩種細胞在細胞增殖能力上沒有明顯差異。當濃度在086499/ml范圍內(nèi)的5一FU作用于兩種細胞時,其對HepG2/R的抑制作用明顯低于HepG2。此外,He
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