山藥多糖的分離純化及其化學(xué)結(jié)構(gòu)的初步研究.pdf

1、本文系統(tǒng)研究了山藥多糖的提取、分離、純化、理化性質(zhì)、抗氧化能力以及對山藥多糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步的研究，這對于充分利用我國薯蕷資源，研究多糖類物質(zhì)的利用以及構(gòu)效關(guān)系具有重要的學(xué)術(shù)意義和很大的應(yīng)用價(jià)值。主要研究內(nèi)容與結(jié)論如下： 1、采用傳統(tǒng)的水溶醇沉法提取山藥多糖，研究了提取過程中的浸提時(shí)間、溫度、固液比等因素對山藥多糖提取的影響，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，影響山藥多糖提取率的各因素主次順序是：溫度>料液比>時(shí)間。山藥多糖的最佳提取參數(shù)為1：

2、20，100℃下浸提2.5h。提取次數(shù)為2次。此時(shí)提取率為3.7％，純度為21.7％。而且運(yùn)用80％的乙醇濃度醇沉2h即可滿足提取要求。 2、山藥多糖的分離純化的研究中發(fā)現(xiàn)：Sevage法+酶法去除蛋白質(zhì)的方法比單純使用Sevage法有優(yōu)勢，即采用酶法去除大部分蛋白質(zhì)后再采用Sevage法去除少部分的游離蛋白質(zhì)，其最主要優(yōu)勢在于多糖的損失小。水解條件為諾維信中性蛋白酶，其酶解條件為40℃，2h，1.5％的酶量，pH為7.0。小分

3、子物質(zhì)的去除采用截留量為8000的透析袋流水透析48h。山藥多糖經(jīng)過DEAE-52柱采用0～1M離子強(qiáng)度梯度層析后分離出兩種多糖：中性多糖和酸性多糖，中性多糖經(jīng)過Sephadex柱層析證明為分子量均一的純多糖，而酸性多糖在Sephadex柱層析中分離出兩種酸性多糖：酸性多糖1和酸性多糖2。紫外光譜分析表明這三種多糖均是不含蛋白質(zhì)的多糖，其旋光度分別為+162.5°、+48°、-128°。而隨后測定三種多糖的去除羥自由基的能力，結(jié)果表明去

4、除羥自由基的能力各有強(qiáng)弱，其中最強(qiáng)的為酸性多糖2，其30μg/ml時(shí)清除率就為50％。 3、多糖的構(gòu)效關(guān)系是指多糖的一級結(jié)構(gòu)和高級結(jié)構(gòu)與其生物活性的關(guān)系。對多糖的研究顯示，多糖的各種生物活性與其結(jié)構(gòu)、構(gòu)像等有著密切的關(guān)系。在對山藥多糖的單糖組成的研究中發(fā)現(xiàn)：山藥中性多糖TLC分析出其為葡萄糖和甘露糖組成，在GC-MS分析中也證實(shí)了這一點(diǎn)，其摩爾組成為0.56：0.44。而在對山藥酸性多糖1的TLC分析中卻發(fā)現(xiàn)并不能有效分離出葡萄