重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對帕金森病治療作用的研究.pdf

1、目的：研究低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激(repetitivetranscranialmagneticstimulation，rTMS)作用于運(yùn)動皮質(zhì)不同亞區(qū)對帕金森病(Parkinson'sdisease，PD)患者運(yùn)動皮質(zhì)興奮性及臨床運(yùn)動功能的影響，優(yōu)化刺激方案，并探討低頻rTMS發(fā)揮作用的時間效應(yīng)。觀察重復(fù)性磁刺激對PC12細(xì)胞基因表達(dá)的影響，試圖間接了解rTMS保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元的機(jī)制。 方法：一、選取18名PD患者，對其先后進(jìn)行4

2、種不同干預(yù)，即口服美多芭、低頻rTMS(0.5Hz，100％靜息閾值，共1600次脈沖)刺激第一軀體運(yùn)動區(qū)手代表區(qū)(handrepresentationoftheprimarymotorcortex，M1Hand)、低頻rTMS(0.5Hz，100％靜息閾值，共1600次脈沖)刺激運(yùn)動前區(qū)(premotorcortex，PMC)以及假刺激。于干預(yù)前后分別進(jìn)行臨床運(yùn)動和認(rèn)知功能評價，并記錄運(yùn)動誘發(fā)電位(motorevokedpotenti

3、als，MEP)、體感誘發(fā)電位成分N30及事件相關(guān)電位P300等相關(guān)指標(biāo)。 二、選取38名PD患者，予0.5Hz低頻rTMS刺激M1HHand，每序列20次脈沖，每天80個序列，序列間隔5sec，磁場強(qiáng)度為100％靜息閾值，連續(xù)7天。于首次治療前及末次治療后1h、1w及1m分別進(jìn)行評價，包括帕金森病統(tǒng)一評分量表(unifiedParkinson'sdiseaseratingscale，UPDRS)、Hoehn＆Yahr分期、Sc

4、hwab&England日常生活活動量表(activitiesofdailylivingscore，ADL)、改良Webster評分以及計時運(yùn)動試驗，并記錄MEP相關(guān)指標(biāo)。應(yīng)用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析處理數(shù)據(jù)，分析低頻rTMS發(fā)揮治療作用的時間效應(yīng)。 三、以不同頻率(1、5、10及20Hz)的重復(fù)性磁刺激分別對神經(jīng)生長因子(nervegrowthfactor，NGF)誘導(dǎo)分化的PC12細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，磁刺激強(qiáng)度為最大輸出強(qiáng)度的40％

5、(1Tesla)，每天磁刺激脈沖數(shù)均為400次，連續(xù)5天。在末次干預(yù)后4h對細(xì)胞進(jìn)行處理，應(yīng)用RT-PCR及Western印記技術(shù)，分別從mRNA和蛋白質(zhì)水平檢測重復(fù)性磁刺激對PC12細(xì)胞酪氨酸羥化酶(tyrosinehydroxylase，TH)、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(dopaminetransporter，DAT)、kf-1、c-fos以及c-jun基因表達(dá)的影響。 結(jié)果：一、①口服美多芭后，UPDRS運(yùn)動評分(UPDRSⅢ)(P=

6、0.001)以及其中僵直(P=0.001)和運(yùn)動遲緩(P＜0.001)評分均較服藥前顯著改善；M1Hand組UPDRSⅢ減低(P=0.015)，僵直(P=0.010)和運(yùn)動遲緩(P=0.004)評分改善；PMC組UPDRSⅢ減低(P=0.046)，僵直評分亦減低，但無顯著性意義(P=0.163)；②口服美多芭1h后MEP120減低(P=0.002)，皮質(zhì)靜止期(corticalsilentperiod，CSP)延長(P=0.006)；M

7、1Hand組CSP延長(P=0.015)，而MEP120無著變；PMC組MEP120減低(P=0.004)，而CSP無著變；假刺激組均無顯著性改變。③不同干預(yù)對PD患者額葉P20～N30峰～峰波幅的影響存在顯著性差異(P=0.041)。posthoct檢驗顯示，美多芭口服后額葉P20～N30波幅較干預(yù)前顯著增加(P＜0.05)，磁刺激M1Hand后該波波幅亦有所增加，但不具顯著性意義(P＞0.05)。其他指標(biāo)如額葉N30和頂葉N20峰潛

8、伏期，頂葉P14～N20、額葉N30～P40峰～峰波幅，以及P/F指數(shù)等，各干預(yù)組之間則無顯著性差異。④各干預(yù)組之間事件相關(guān)電位P300潛伏期無顯著性差異(P=0.089)，反應(yīng)時間則有顯著不同(P=0.003)。posthoc配對t檢驗顯示，口服美多芭及M1Hand磁刺激后反應(yīng)時間顯著縮短(P＜0.05)。 二、①PD患者自身雙側(cè)比較，主要病變側(cè)較對側(cè)MEP120增加(P＜0.01)，CSP縮短(P＜0.01)，而靜息閾值(r

9、elaxedmotorthreshold，RMT)及中樞運(yùn)動傳導(dǎo)時間(centralmotorconductiontime，CMCT)無顯著性差異(P＞0.05)；②低頻rTMS干預(yù)后，PD患者UPDRS、改良Webster、ADL、UPDRSⅢ、僵直、運(yùn)動遲緩評分以及計時運(yùn)動試驗均存在顯著的時間效應(yīng)(P＜0.001)。Hoehn＆Yahr分期(P=0.173)及震顫評分(P=0.110)則未見顯著差異。CSP亦存在顯著的時間效應(yīng)(P＜

10、0.001)，其他MEP指標(biāo)如RMT、MEP120及CMCT等則無顯著性差異(P＞0.05)。在末次干預(yù)后1w內(nèi)PD患者運(yùn)動功能的改善達(dá)到高峰，與CSP的變化規(guī)律一致。 三、各干預(yù)組之間TH、DAT、kf-1、c-fos及c-jun基因表達(dá)均存在顯著性差異(P值依次為0.003，0.017，0.019，0.029及0.042)。與對照組相比較，5Hz組TH(P=0.003)及DAT(P=0.020)基因mRNA水平顯著增加；而2

11、0Hz組kf-1(P=0.013)、c-fos(P=0.003)以及c-jun(P=0.005)基因均表達(dá)上調(diào)。Western印記分析顯示各干預(yù)組之間TH蛋白的表達(dá)并無顯著差異(P=0.273)。 結(jié)論：M1Hand低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激可調(diào)節(jié)運(yùn)動皮質(zhì)的興奮性，從而改善PD患者的運(yùn)動功能；重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對PD癥狀的改善具有顯著的時間效應(yīng)，其變化與CSP一致；重復(fù)性磁刺激可促使NGF誘導(dǎo)分化的PC12細(xì)胞TH和DAT基因mRNA表達(dá)上