復(fù)雜樣品中藥物檢測前處理方法的研究與應(yīng)用.pdf

1、隨著生活水平的提高,食品安全和人體健康問題越來越引起人們的關(guān)注,各類藥物的檢測問題也頗受人們的關(guān)注,復(fù)雜基體中藥物殘留的檢測主要分為前處理和檢測兩部分,隨著科技進步,儀器的靈敏度、選擇性和精密度已經(jīng)能夠滿足一般樣品測定的要求。對于基質(zhì)比較復(fù)雜的樣品,制約其農(nóng)殘檢測的關(guān)鍵問題是樣品前處理。本文對現(xiàn)有的前處理技術(shù)進行綜述,并利用熒光猝滅法研究藥物分子與樣品基質(zhì)的相互結(jié)合作用,闡明藥物在水產(chǎn)品樣品基質(zhì)中的存在狀態(tài),為藥物殘留的提取提供理論依據(jù)

2、,并結(jié)合乙腈-無機鹽-水雙水相基質(zhì)去除法和改進QuEChERS法與氣相色譜檢測技術(shù)建立了檢測魚肉樣品中擬除蟲菊酯的方法、結(jié)合分子印跡技術(shù)與化學(xué)發(fā)光法建立了檢測尿液中苯乙雙胍的方法、結(jié)合平衡透析法與化學(xué)發(fā)光法研究了苯乙雙胍和蛋白質(zhì)的結(jié)合作用。
　　論文主要分為五部分:
　　第一部分:對復(fù)雜樣品的前處理方法進行綜述,并闡明了課題的研究內(nèi)容和意義。
　　第二部分:基于乙腈-無機鹽-水雙水相基質(zhì)去除樣品前處理和氣相色譜法建立了

3、一種環(huán)境友好型檢測魚肉樣品中擬除蟲菊酯的方法。實驗利用熒光猝滅法與氣相色譜法法研究了擬除蟲菊酯藥物在以蛋白質(zhì)為主要基質(zhì)的水產(chǎn)品中的存在狀態(tài),考查了雙水相的形成條件,并探討了蛋白質(zhì)對雙水相萃取率的影響。結(jié)果表明擬除蟲菊酯藥物通過疏水作用力與蛋白質(zhì)牢固結(jié)合。體積分數(shù)為80％的乙腈水溶液作為萃取液可以引起水產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)基質(zhì)緩慢而徹底的變性,充分釋放與蛋白質(zhì)結(jié)合的藥物,然后再加入K2HPO4鹽形成雙水相體系,藥物殘留進入雙水相上相實現(xiàn)擬除蟲菊

4、酯的均相高效萃取。80%的乙腈水溶液具有較強化學(xué)極性,與藥物殘留共同進入上相的脂溶性雜質(zhì)較少,萃取液凈化步驟大大簡化。在雙水相上相中加入無水MgSO4、PSA去除水分與雜質(zhì)后直接進樣進行氣相色譜檢測。該方法用于魚肉樣品中六種擬除蟲菊酯的萃取檢測,回收率為81.1~96.4%,檢出限為8~14ng·mL-1。
　　第三部分:本文利用改進QuEChERS法結(jié)合氣相色譜檢測技術(shù),提出一種新的檢測魚肉中六種擬除蟲菊酯的方法。最初QuECh

5、ERS方法只采用乙腈作為提取劑,本文用異丙醇代替乙腈來改進QuEChERS方法。結(jié)果表明,對于蛋白基質(zhì)樣品中的擬除蟲菊酯,選用異丙醇為提取劑的改進QuEChERS方法,其提取率(75.8~89.4%)高于傳統(tǒng)QuEChERS方法中的乙腈提取率(68.9~84.8%)。運用熒光猝滅法研究了擬除蟲菊酯與BSA的結(jié)合作用,結(jié)果表明,擬除蟲菊酯與BSA有較強的結(jié)合作用,這種結(jié)合作用會降低以對蛋白為基質(zhì)的樣品中擬除蟲菊酯的提取率。本文以體積分數(shù)為

6、80%的異丙醇為提取劑,在此環(huán)境下,魚肉中的蛋白質(zhì)會發(fā)生緩慢且完全的變性,釋放與其結(jié)合的擬除蟲菊酯藥物,進而得到較高的提取率。本方法用于檢測魚肉中的6中擬除蟲菊酯得到滿意結(jié)果。本論文提出一種通過減慢蛋白質(zhì)變性速度使其釋放與其結(jié)合藥物,進而提高以魚肉中擬除蟲菊酯提取率的新方法。
　　第四部分:以α-甲基丙烯酸(MAA)為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)為交聯(lián)劑,偶氮二異丁腈(AIBN)為引發(fā)劑,合成鹽酸苯乙雙胍分子印跡聚

7、合物,并制備了在線富集發(fā)光流通柱,利用N-溴代丁二酰亞胺(NBS)-曙紅Y(EY)-鹽酸苯乙雙胍化學(xué)發(fā)光體系,結(jié)合流動注射分析技術(shù),建立了高選擇性、高靈敏測定鹽酸苯乙雙胍的分子印跡化學(xué)發(fā)光分析法。該方法線性范圍為0.09~2.0μg·mL-1,線性相關(guān)系數(shù)為0.9920,檢出限為0.031μg·mL-1,對1.0×10-6g·mL-1鹽酸苯乙雙胍溶液平行測定11次的相對標準偏差為,1.0%。該方法已用于尿液中鹽酸苯乙雙胍的測定。

8、　　第五部分:利用化學(xué)發(fā)光法結(jié)合平衡透析技術(shù),研究了鹽酸苯乙雙胍藥物和牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。利用NBS-曙紅Y化學(xué)發(fā)光體系建立了新的檢測鹽酸苯乙雙胍的方法,研究了其發(fā)光機理,并對化學(xué)發(fā)光條件進行了優(yōu)化。在最優(yōu)實驗條件下,化學(xué)發(fā)光強度與苯乙雙胍濃度在4.6×10-8~5.0×10-5g·mL-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,計算其檢出限為1.5×10-8g·mL-1。利用Klotz plot和Scatchard分析法對化學(xué)發(fā)光-平衡透