SH2-B在結(jié)腸癌中的表達及作用機制研究.pdf

1、目的：探討SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的演變規(guī)律以及在結(jié)腸癌中異常表達，明確在腫瘤細胞中SH2-B的過表達促進細胞異常增殖從而參與細胞癌變的作用機制。 方法：用免疫組織化學方法檢測29例結(jié)腸癌組織、27例結(jié)腸腺瘤組織、29例結(jié)腸息肉組織、38例鼻咽癌組織中的SH2-B的表達，獲得SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的表達規(guī)律。用LipofecTAMINE2000將pcDNA3.1-SH2-B質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293細胞，用Western-bl

2、otting分析轉(zhuǎn)染SH2-B基因后SH2-B的表達，MTT法分析SH2-B對細胞增殖的影響，明確SH2-B通過增強細胞增殖而促進腫瘤發(fā)生、發(fā)展。 結(jié)果：①免疫組織化學檢測結(jié)果顯示，在顯微鏡下SH2-B在結(jié)腸息肉組織、結(jié)腸腺瘤組織、結(jié)腸癌組織、鼻咽癌組織中的表達呈漿-核型，以胞漿為主。結(jié)果顯示：結(jié)腸息肉、結(jié)腸腺瘤、結(jié)腸癌患者SH2-B陽性率為分別為31％（9/29）、52％（14/27）、93％（27/29），鼻咽癌患者SH2-

3、B陽性率為87％（33/38）。結(jié)腸癌組織中SH2-B的陽性細胞表達率（0.64±0.26）明顯高于結(jié)腸腺瘤組織（0.26±0.27）和結(jié)腸息肉組織（0.12±0.21）（P<0.001），結(jié)腸腺瘤組織中SH2-B陽性細胞表達率明顯高于結(jié)腸息肉組織（P<0.05），結(jié)腸癌組織中SH2-B陽性細胞表達率（0.64±0.26）略高于鼻咽癌組織（0.49±0.28，p<0.05）。SH2-B表達強度計分，結(jié)腸癌細胞（2.76±1.18）明顯高

4、于腺瘤細胞（0.77±0.85）和結(jié)腸息肉細胞（0.72±1.16，p<0.0001），腺瘤細胞與息肉細胞間無明顯差異（P>0.05）；結(jié)腸癌細胞（2.76±1.18）與鼻咽癌細胞（3.03±1.30）之間無顯著性差異（P>0.05），提示SH2-B在結(jié)腸癌變中可能具有重要作用。②細胞增殖實驗中，將pcDNA3.1-SH2-B質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染HEK293細胞，Western-blotting檢測SH2-B表達，結(jié)果表明：pcDNA3.1-

5、SH2-B在HEK293中表達明顯增高。MTT法分析細胞增殖結(jié)果，轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-SH2-B后細胞增殖顯著強（P<0.05）。結(jié)果提示，SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的高表達可能促進結(jié)腸上皮細胞異常增殖。 結(jié)論：⑴結(jié)腸癌變是一個多因素作用、多基因參與、多階段發(fā)展的復雜過程。SH2-B在結(jié)腸息肉、結(jié)腸腺瘤和結(jié)腸癌組織中表達逐步增強，推斷SH2-B異?；罨赡苁墙Y(jié)腸癌變的早期事件，可能在結(jié)腸癌變早期發(fā)揮重要作用。⑵SH2-B促進細