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文檔簡介
1、目的:探討SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的演變規(guī)律以及在結(jié)腸癌中異常表達,明確在腫瘤細胞中SH2-B的過表達促進細胞異常增殖從而參與細胞癌變的作用機制。 方法:用免疫組織化學方法檢測29例結(jié)腸癌組織、27例結(jié)腸腺瘤組織、29例結(jié)腸息肉組織、38例鼻咽癌組織中的SH2-B的表達,獲得SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的表達規(guī)律。用LipofecTAMINE2000將pcDNA3.1-SH2-B質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293細胞,用Western-bl
2、otting分析轉(zhuǎn)染SH2-B基因后SH2-B的表達,MTT法分析SH2-B對細胞增殖的影響,明確SH2-B通過增強細胞增殖而促進腫瘤發(fā)生、發(fā)展。 結(jié)果:①免疫組織化學檢測結(jié)果顯示,在顯微鏡下SH2-B在結(jié)腸息肉組織、結(jié)腸腺瘤組織、結(jié)腸癌組織、鼻咽癌組織中的表達呈漿-核型,以胞漿為主。結(jié)果顯示:結(jié)腸息肉、結(jié)腸腺瘤、結(jié)腸癌患者SH2-B陽性率為分別為31%(9/29)、52%(14/27)、93%(27/29),鼻咽癌患者SH2-
3、B陽性率為87%(33/38)。結(jié)腸癌組織中SH2-B的陽性細胞表達率(0.64±0.26)明顯高于結(jié)腸腺瘤組織(0.26±0.27)和結(jié)腸息肉組織(0.12±0.21)(P<0.001),結(jié)腸腺瘤組織中SH2-B陽性細胞表達率明顯高于結(jié)腸息肉組織(P<0.05),結(jié)腸癌組織中SH2-B陽性細胞表達率(0.64±0.26)略高于鼻咽癌組織(0.49±0.28,p<0.05)。SH2-B表達強度計分,結(jié)腸癌細胞(2.76±1.18)明顯高
4、于腺瘤細胞(0.77±0.85)和結(jié)腸息肉細胞(0.72±1.16,p<0.0001),腺瘤細胞與息肉細胞間無明顯差異(P>0.05);結(jié)腸癌細胞(2.76±1.18)與鼻咽癌細胞(3.03±1.30)之間無顯著性差異(P>0.05),提示SH2-B在結(jié)腸癌變中可能具有重要作用。②細胞增殖實驗中,將pcDNA3.1-SH2-B質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染HEK293細胞,Western-blotting檢測SH2-B表達,結(jié)果表明:pcDNA3.1-
5、SH2-B在HEK293中表達明顯增高。MTT法分析細胞增殖結(jié)果,轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-SH2-B后細胞增殖顯著強(P<0.05)。結(jié)果提示,SH2-B在結(jié)腸癌變過程中的高表達可能促進結(jié)腸上皮細胞異常增殖。 結(jié)論:⑴結(jié)腸癌變是一個多因素作用、多基因參與、多階段發(fā)展的復雜過程。SH2-B在結(jié)腸息肉、結(jié)腸腺瘤和結(jié)腸癌組織中表達逐步增強,推斷SH2-B異?;罨赡苁墙Y(jié)腸癌變的早期事件,可能在結(jié)腸癌變早期發(fā)揮重要作用。⑵SH2-B促進細
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