血漿纖維蛋白原檢測(cè)質(zhì)控物的研制與評(píng)價(jià).pdf

1、目的:為了進(jìn)一步提高臨床實(shí)驗(yàn)室纖維蛋白原檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性和可比性,改變纖維蛋白原檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控以及室間質(zhì)量評(píng)價(jià)所用的質(zhì)控物濃度水平較為單一的現(xiàn)狀,促進(jìn)纖維蛋白原檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化,我們研制了多個(gè)濃度水平的纖維蛋白原質(zhì)控物。
　　 方法:1.質(zhì)控物的研制:對(duì)不同的制備方法和制備過程中的關(guān)鍵影響因素進(jìn)行研究和分析,選擇合適的制備方法和實(shí)驗(yàn)條件制訂最佳制備方案,制備了5個(gè)批號(hào)3個(gè)濃度水平(2個(gè)異常低值、1個(gè)正常水平、2個(gè)異常高值)的質(zhì)控物。2

2、.制備物的評(píng)價(jià):(1)參照《中國(guó)生物制品檢定規(guī)程》的相關(guān)要求對(duì)制備物的外觀性狀、殘水量和復(fù)溶性進(jìn)行評(píng)價(jià)。(2)參照CNAS-GL03《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)指南》及ISO Guide35《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品的定值—通用原則和統(tǒng)計(jì)原理》對(duì)制備物的均勻性和穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)。①均勻性評(píng)價(jià):每批號(hào)制備物隨機(jī)抽取10支進(jìn)行檢測(cè),每支重復(fù)檢測(cè)2次,檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析并計(jì)算均勻性不確定度。②穩(wěn)定性評(píng)價(jià):對(duì)制備物置于冷藏(4℃～8℃)、室

3、溫(22℃～26℃)和37℃三種條件下的穩(wěn)定性、制備物復(fù)溶后使用并置于冷藏和室溫條件下的復(fù)溶穩(wěn)定性以及將制備物置于冷藏條件下儲(chǔ)存的長(zhǎng)期穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià),對(duì)長(zhǎng)期穩(wěn)定性評(píng)價(jià)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行一元線性回歸分析并計(jì)算長(zhǎng)期穩(wěn)定性不確定度；在進(jìn)行每種穩(wěn)定性評(píng)價(jià)時(shí),同時(shí)使用商品質(zhì)控物作為對(duì)照。3.制備物的試應(yīng)用:(1)將制備物試用于Sysmex CA1500全自動(dòng)凝血分析儀FIB檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)量控制,同時(shí)檢測(cè)商品質(zhì)控物作為對(duì)照。(2)將制備物(批號(hào)為20111

4、6S、201117S)與商品質(zhì)控物(批號(hào)為201111～201115)同步發(fā)放進(jìn)行室間質(zhì)量評(píng)價(jià)調(diào)查,回報(bào)結(jié)果參照室間質(zhì)評(píng)方案進(jìn)行分析,以了解制備物用于室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的可行性。
　　 結(jié)果:
　　 1.質(zhì)控物的研制:選取人新鮮冰凍血漿為原料,采用低溫乙醇沉淀法分離提取纖維蛋白原,將其加入正常血漿或乏纖維蛋白原血漿中,經(jīng)穩(wěn)定化處理后配制成5個(gè)批號(hào)3個(gè)濃度水平的纖維蛋白溶液,然后分裝成1ml/瓶并進(jìn)行冷凍干燥,最終制備出5個(gè)批號(hào)

5、的質(zhì)控物(批號(hào)分別為20101011、20101012、20101013、20101014、20101015)。
　　 2.制備物的評(píng)價(jià):(1)制備物的外觀性狀符合要求,復(fù)溶性良好,殘水量分布范圍為1.79％～1.97％。(2)均勻性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià):①均勻性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示,5個(gè)批號(hào)制備物的樣品內(nèi)和樣品間FIB檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；制備物與商品質(zhì)控物的均勻性檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)(CV)范圍分別為1.7％～3.4％和2

6、.7％,均小于儀器檢測(cè)批內(nèi)不精密度的允許限(4％)以及基于生物學(xué)變異的允許不精密度(5.4％)；5個(gè)批號(hào)制備物的FIB均勻性不確定度范圍為0.009g/L～0.085g/L,分別小于對(duì)應(yīng)的方法重復(fù)性測(cè)量的不確定度0.019g/L～0.180g/L。②穩(wěn)定性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示,各批號(hào)制備物置于室溫條件下14天內(nèi)檢測(cè)較冷藏條件檢測(cè)結(jié)果的偏差范圍為-5.2％～2.1％,而置于37℃條件下3天內(nèi)檢測(cè)較冷藏條件檢測(cè)結(jié)果的偏差范圍為-33.0％～6.4％

7、；制備物復(fù)溶后置于冷藏條件12h內(nèi)檢測(cè)較立即檢測(cè)的結(jié)果偏差為-1.2％～4.5％,而置于室溫條件下3h和6h時(shí)檢測(cè)較立即檢測(cè)的結(jié)果偏差分別為-3.8％～1.5％和-7.8％～5.4％;20101011、20101012、20101014和20101015批號(hào)制備物置于冷藏條件在32周內(nèi)的穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果隨著保存時(shí)間無(wú)線性趨勢(shì)變化(P>0.05),而20101013批號(hào)制備物置于冷藏條件僅在24周內(nèi)的穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果隨著保存時(shí)間無(wú)線性趨勢(shì)變化

8、(P>0.05)；穩(wěn)定期內(nèi)5個(gè)批號(hào)制備物與商品質(zhì)控物FIB的長(zhǎng)期穩(wěn)定性不確定度范圍分別為0.009g/L～0.066g/L和0.033g/L,分別小于對(duì)應(yīng)的方法重復(fù)測(cè)量的不確定度。
　　 3.制備物的試應(yīng)用:①室內(nèi)質(zhì)控試應(yīng)用結(jié)果顯示,5個(gè)批號(hào)制備物在Sysmex CA1500上3個(gè)月內(nèi)每次檢測(cè)的結(jié)果均在均值±3s范圍之內(nèi),日間不精密度(CVbetween)范圍為1.8％～5.8％,商品質(zhì)控物的CVbetween為3.0％。②室間

9、質(zhì)量評(píng)價(jià)調(diào)查結(jié)果顯示,201116S和201117S批號(hào)制備物各組別檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)分別6.2％～16.0％和4.7％～19.2％,及格率范圍分別為71.4％～96.3％和70.6％～97.0％；商品質(zhì)控物的各組別檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)和及格率分別為3.6％～18.0％和55.0％～100％。
　　 結(jié)論:摸索出了制備纖維蛋白原質(zhì)控物的合適方法和實(shí)驗(yàn)條件,能夠制備出濃度水平可控的纖維蛋白原質(zhì)控物。制備的5個(gè)批號(hào)質(zhì)控物具有合格的外觀