2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  研究腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)對(duì)急性肝衰竭(Acute liver failure,ALF)大鼠發(fā)生腸道細(xì)菌移位時(shí)腸粘膜Claudin-1、ZO-1蛋白和肌球蛋白輕鏈激酶(myosin light chain kinase,MLCK)表達(dá)的影響及TNF-α拮抗劑干預(yù)效果。
  方法:
  健康雄性SD大鼠54只,按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成3組,正常對(duì)照組6只腹

2、腔注射0.9%生理鹽水12ml/kg;模型組、干預(yù)組各24只,均給予腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GalN)1200 mg/kg建立急性肝衰竭模型,干預(yù)組在給予D-氨基半乳糖24小時(shí)前給予腹腔注射TNF-α拮抗劑(rhTNFR:Fc益賽普)12.5mg/kg。模型組與干預(yù)組于腹腔注射D-氨基半乳糖后8、24、48、72h各處死6只動(dòng)物,正常對(duì)照組于72h同時(shí)處死動(dòng)物,進(jìn)行以下指標(biāo)檢測(cè):①取各組肝、脾和腸系膜淋巴結(jié)組織勻漿進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng);②應(yīng)

3、用生化學(xué)方法檢測(cè)血清ALT、AST、Tbil、Alb水平;③酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)方法檢測(cè)血清TNF-α的水平;④肝組織和末段回腸組織經(jīng)HE染色后光鏡下觀察病理變化;⑤免疫組化和Western blot檢測(cè)各組末段回腸Claudin-1、ZO-1蛋白和MLCK的表達(dá)。
  結(jié)果:
  1、模型組與干預(yù)組ALT、AST逐漸升高,均于48h達(dá)到高峰,但干預(yù)組高峰較模型組高峰明顯降低;隨著時(shí)間延長(zhǎng),模型組與干預(yù)組出現(xiàn)總膽紅

4、素升高,但模型組的總膽紅素升高速度比干預(yù)組明顯快;模型組72h轉(zhuǎn)氨酶開(kāi)始出現(xiàn)下降時(shí),總膽紅素繼續(xù)上升,出現(xiàn)膽酶分離現(xiàn)象,而干預(yù)組72h總膽紅素出現(xiàn)下降。急性肝衰竭模型組72h肝臟組織呈大片融合壞死,超過(guò)整個(gè)切片面積的2/3,肝臟組織的正常結(jié)構(gòu)消失,僅殘留少量肝細(xì)胞,肝竇出血、充血明顯,在壞死區(qū)及匯管區(qū)可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),符合急性肝衰竭病理改變,急性肝衰竭模型誘導(dǎo)成功;干預(yù)組72h肝臟組織可見(jiàn)部分肝細(xì)胞水腫、點(diǎn)狀壞死,少量炎性細(xì)胞呈散在

5、性浸潤(rùn)于肝小葉內(nèi)和匯管區(qū);在光鏡下模型組72h末段回腸可見(jiàn)絨毛伏倒,部分絨毛尖端脫落,絨毛黏膜和黏膜下層間質(zhì)水腫,黏膜層可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。干預(yù)組72h末段回腸結(jié)完整,未見(jiàn)粘膜上皮細(xì)胞脫落壞死情況,絨毛黏膜和黏膜下層間質(zhì)輕度水腫,黏膜層可見(jiàn)少量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。
  2、正常對(duì)照組、模型組8h和干預(yù)組8h均未出現(xiàn)臟器細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性,模型組24h、48h和72h臟器細(xì)菌移位率分別為11.1%、38.89%和66.67%,干預(yù)組24h

6、、48h和72h臟器細(xì)菌移位率分別為5.56%、16.67%和27.78%。對(duì)照組與模型組、對(duì)照組與干預(yù)組24h、48h和72h之間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均P<0.05;干預(yù)組和模型組兩組24h、48h和72h之間的比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均P<0.05。
  3、模型組大鼠8h的TNF-α含量為(117.89±13.09pg/ml),24h上升至高峰(239.83±15.81pg/ml),隨后開(kāi)始下降,48h、72h分別降

7、低至(149.37±20.86pg/ml、96.41±4.21pg/ml),與正常對(duì)照組(24.19±3.57pg/ml)比較差異均有顯著性差異(P<0.01);而干預(yù)組大鼠的血清TNF-α含量于8h(52.06±18.06pg/ml)逐漸升高,于24h達(dá)到高峰(182.71±17.08pg/ml),48h開(kāi)始下降至(71.78±20.15pg/ml),72h進(jìn)一步下降為(57.22±7.39pg/ml),與正常對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義(干預(yù)組8h、48h與正常對(duì)照組的P<0.05,24h、72h的P<0.01),且與模型組各時(shí)間點(diǎn)TNF-α含量比較差異均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
  4、western blot測(cè)定相對(duì)蛋白含量,模型組8h Claudin-1蛋白水平為0.9932±0.1849,與正常對(duì)照組1.640±0.1879的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.908,p<0.01),逐漸下降,24h降至最低0.3546±0.068,明顯低于對(duì)照組

9、(t=12.87,p<0.01),72h為0.8322±0.1169,低于對(duì)照組(t=7.301,p<0.01);干預(yù)組8h Claudin1蛋白為1.387±0.2163,與對(duì)照組相比無(wú)差異(t=1.770,p>0.05),但與模型組8h比較稍高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(t=2.765,p<0.05);24h驟降至1.051±0.3702,明顯低于對(duì)照組(t=2.838,p<0.05),而高于模型組24h(t=3.700,p<0.05);72h

10、為1.18103±0.1501,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.818,p<0.01),高于模型組72h(t=3.668,p<0.05)。模型組8h ZO-1蛋白水平為0.7256±0.09153,與正常對(duì)照組的1.015±0.1503差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.293,p<0.05),逐漸下降,24h降至最低0.3874±0.09148,明顯低于對(duì)照組(t=7.137,p<0.01),72h為0.5867±0.1780,明顯低于對(duì)

11、照組(t=4.534,p<0.01);干預(yù)組8h ZO-1蛋白為0.8179±0.1190,與對(duì)照組相比無(wú)差異(t=2.060,p>0.05),與模型組8h比較稍高,差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(t=1.229,p>0.05),24h驟降至0.6423±0.08182,明顯低于對(duì)照組(t=4.36,p<0.05),而高于模型組24h,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.153,p<0.01),72h為0.7622±0.09943,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

12、t=2.653,p<0.05),仍高于模型組72h(t=2.824,p<0.05)。模型組8h MLCK蛋白水平為0.6959±0.1295,與正常對(duì)照組的0.4597±0.06882差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.221,p<0.05),逐漸升高,24h升至高峰1.298±0.1935,明顯高于對(duì)照組(t=8.164,p<0.01),72h為0.9255±0.1575,高于對(duì)照組(t=5.420,p<0.01);干預(yù)組8h MLCK蛋白為0

13、.5716±0.1566,與對(duì)照組相比無(wú)差異(t=1.308,p>0.05),與模型組8h比較稍低,差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(t=1.224,p>0.05),隨后逐漸升高,24h為1.033±0.07282,明顯高于對(duì)照組(t=11.44,p<0.01),但低于模型組24h,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.564,p<0.05),72h恢復(fù)至0.6338±0.09899,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.889,p=0.0277,p<0.05),低

14、于模型組72h,比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.136,p<0.05)。免疫組化結(jié)果顯示正常對(duì)照組的Claudin-1和ZO-1蛋白定位在細(xì)胞膜頂端,大量棕褐色染色信號(hào)陽(yáng)性,MLCK蛋白在胞漿中可見(jiàn)棕褐色染色信號(hào)。模型組72h的Claudin-1和ZO-1蛋白在細(xì)胞膜頂端表現(xiàn)為棕褐色信號(hào)減弱,呈鋸齒狀分布并有中斷現(xiàn)象,但MLCK蛋白的棕褐色染色信號(hào)呈強(qiáng)陽(yáng)性。Claudin-1蛋白在干預(yù)組72h回腸組織內(nèi)陽(yáng)性信號(hào)稍有減弱,與正常對(duì)照組比較陽(yáng)性染

15、色信號(hào)有所下降,但與模型組比較陽(yáng)性信號(hào)明顯增強(qiáng);ZO-1蛋白在干預(yù)組72h回腸組織內(nèi)可見(jiàn)棕褐色陽(yáng)性染色信號(hào),與正常對(duì)照組比較有所減弱,但與模型組比較有增強(qiáng)變化;MLCK蛋白在干預(yù)組72h回腸腸粘膜上皮細(xì)胞胞漿中強(qiáng)陽(yáng)性染色信號(hào),比正常對(duì)照組染色信號(hào)稍強(qiáng),但比模型組72h染色信號(hào)減弱。
  結(jié)論:
  急性肝衰竭大鼠模型的血清TNF-α水平升高,TNF-α通過(guò)增加MLCK含量使得細(xì)胞收縮加劇及細(xì)胞間隙增大,同時(shí)TNF-α使Cla

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