橙色紅曲菌ctnG基因和ctnH基因缺失菌株的構(gòu)建及其功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紅曲菌是我國傳統(tǒng)的食品發(fā)酵用菌,可以產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì),被應(yīng)用于食品、保健品和醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。但由于紅曲菌會產(chǎn)生桔霉素,使紅曲產(chǎn)品的安全性受到質(zhì)疑。
　　 本文采用基因敲除技術(shù),構(gòu)建了ctnG基因紅曲菌缺失菌株,為闡明桔霉素代謝途徑提供理論依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下:
　　 1、通過生物信息學(xué)分析,推測ctnG基因編碼β型碳酸酐酶,ctnH基因編碼短鏈脫氫酶,并預(yù)測ctnG和ctnH基因可能參與桔霉素的PKS后修飾過程。<

2、br>　　 2、成功構(gòu)建了兩端含目的基因同源臂序列、中間為潮霉素抗性基因的置換型打靶載體pCTNG-HPH和pCTNH-HPH。
　　 3、采用原生質(zhì)體PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化將置換型打靶載體pCTNG-HPH和pCTNH-HPH分別轉(zhuǎn)入紅曲菌AS3.4384原生質(zhì)體中,采用潮霉素抗性篩選、打點雜交初篩和Southern雜交驗證,最終獲得3株ctnG紅曲菌缺失菌株,ctnH紅曲菌缺失株正在驗證中。
　　 4、采用HPLC法檢測c

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