米曲霉內(nèi)切型纖維素酶的純化及性質(zhì)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、纖維素酶( Cellulase)是分解纖維素的一類酶,包括內(nèi)切葡聚糖酶(endo-1,4-β-D-glucanase，EC3.2.1.4)、外切葡聚糖酶(exo-1,4-β-D-glucanase，EC3.2.1.91)和β-葡萄糖苷酶(β-1,4-glucosidase，EC3.2.1.21)，這些酶組分協(xié)同作用將纖維素分解為葡萄糖。內(nèi)切型纖維素酶是內(nèi)切型β-1，4-葡聚糖苷酶的簡稱(也稱 Cx酶或 CMC酶)，屬于纖維素酶系，能將大

2、分子纖維素降解為纖維寡糖，在纖維素酶系水解纖維素的過程中起關鍵作用。米曲霉滬釀3.042是常用的釀造菌株，其分泌的纖維素酶分解物料中的纖維素成分，有助于蛋白酶發(fā)揮作用。
　　本文采用剛果紅染色法從米曲霉滬釀3.042成曲中鑒定出4種內(nèi)切型纖維素酶組分，分別稱為Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ、Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ。粗酶液經(jīng) DEAE-Cellulose-52離子交換柱層析得到4個活性峰，將4個活性峰用蒸餾水透析、濃縮后，以制備電泳法純化得到 Cx

3、酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ、Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ。經(jīng) SDS-PAGE分析，分離純化到的Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ、Cx酶Ⅲ為電泳純的單一條帶，分子量分別約為31.8 kDa，34 kDa和26 kDa；Cx酶Ⅳ含有4個亞基，亞基的分子量分別約為14 kDa，23.6 kDa，26 kDa，33.5 kDa。
　　對米曲霉滬釀3.042成曲內(nèi)切型纖維素酶酶學性質(zhì)分析研究表明：粗酶的最適反應溫度為50℃，酶在30℃～60℃穩(wěn)定性較好;酶促反應最適 pH為

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