油茶果殼中活性成分純化新方法及其在綠色合成中的應(yīng)用.pdf

1、油茶(camellia oleifera)系山茶科山茶屬植物，是我國特有最大的木本油料作物。油茶殼為油茶籽的外種皮，占油茶種子質(zhì)量的30％-34%左右，在榨油過程中一般會被丟棄或作為燃料。一些研究表明：油茶殼中含有豐富的活性成分如纖維素、黃酮和原花青素等多羥基或多酚羥基化合物。若能對其進行高效的開發(fā)利用，一方面可以對廢棄物進行再利用，防止對生態(tài)環(huán)境造成污染；另一方面通過提取其中活性成分也可帶來可觀的經(jīng)濟效益。但目前很少有針對油茶殼中活性

2、成分提取及利用方面的研究報道。
　　本論文以江西省豐富的油茶殼資源為原料，考察了油茶殼中黃酮類活性成分和原花青素類活性成分的提取、分離和純化工藝及其結(jié)構(gòu)的鑒定分析。針對天然產(chǎn)物中活性成分的分離、純化往往較為困難這一難點，重點考察了運用大孔樹脂柱層析的方式對油茶殼中活性成分分離、純化的效果；實驗過程中同時采用了高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜(HPLC-MS)聯(lián)用的方式對油茶殼中原花青素活性成分進行了結(jié)構(gòu)鑒定。并且，針對大孔樹脂層析柱柱效低

3、等問題，制備了一種對油茶殼提取液中典型的黃酮類化合物-槲皮素具有特異性吸附作用的分子印跡聚合物微球，對該印跡聚合物微球的吸附機理和特異性識別能力進行了深入的研究，并將印跡聚合物微球作為固相萃取吸附劑應(yīng)用于實際油茶殼樣品中目標化合物的分離、純化研究。此外，針對油茶殼提取液中活性成分具有較強的還原性，利用油茶殼提取液還原金納米微粒前驅(qū)體氯金酸，制備了金納米微粒，并對金納米微粒的性能和還原機理進行了探討。其研究的具體內(nèi)容及成果包括：
　

4、　1.針對傳統(tǒng)的有機溶劑提取法存在消耗大量有機溶劑、且效率低等問題，建立了超聲微波酶解協(xié)同提取油茶殼中原花青素的方法。通過單因素試驗，探討了各主要因素對原花青素提取率的影響規(guī)律。實驗中發(fā)現(xiàn)，往提取液中加入適量纖維素酶，可顯著提高原花青素的提取率。在此基礎(chǔ)上，通過正交試驗，優(yōu)化并獲得了超聲微波酶解協(xié)同提取原花青素的最適宜條件。最適宜提取條件為：超聲波頻率40 KHz、微波功率200 W、提取時間60 s、料液比l:6、提取溫度50 ℃、0

5、.1%纖維素酶0.5 mL、提取次數(shù)2次。在最適宜條件下，原花青素的提取率為4.46%，分別是超聲提取、微波提取和超聲-微波協(xié)同提取的4.0、3.3和1.8倍。本文所建立的超聲微波酶解協(xié)同提取油茶殼中原花青素的方法具有簡便、快速、高效和節(jié)能等優(yōu)勢，有利于應(yīng)用推廣。
　　2.針對天然產(chǎn)物組成復(fù)雜，活性成分分離、純化困難這一問題，采用大孔樹脂柱層析的方式對油茶殼粗提液中黃酮類活性成分和原花青素類活性成分進行分離、純化。通過比較AB-8

6、大孔樹脂和HPD-100A大孔樹脂對活性成分的分離、純化效果，建立了以AB-8大孔樹脂作為柱層析吸附填料，采用乙醇-水溶劑梯度洗脫的方式對其所含的黃酮類活性成分和原花青素類活性成分進行有效分離、純化。采用HPLC/MS/MS聯(lián)用技術(shù)對過柱純化產(chǎn)品中原花青素類活性成分的組成進行了詳細的定性分析。
　　3.針對利用AB-8大孔樹脂柱層析分離、純化油茶殼中黃酮類活性成分柱效率不高的問題，本文采用分子印跡技術(shù)，以槲皮素為模板分子，制備了槲

7、皮素分子印跡聚合物微球，并將這種印跡聚合物微球作為固相萃取吸附劑選擇性富集、純化油茶殼粗提液中的槲皮素，建立了一種高效分離、純化油茶殼粗提液中槲皮素的新方法。實驗結(jié)果表明：采用沉淀聚合方式制備的分子印跡聚合物微球?qū)﹂纹に胤肿泳哂辛己玫奶禺愋晕侥芰?，能夠選擇性識別槲皮素分子及其類似物。與傳統(tǒng)本體聚合法制備的印跡聚合物相比,本法制備的印跡聚合物微球具有更高的吸附容量和更好的特異性識別能力，為油茶殼中槲皮素及其類似物提供了一種高效分離、純化

8、的新方法。
　　4.針對油茶殼提取物中所含的黃酮類活性成分和原花青素類活性成分均為多酚類化合物，具有較強的還原性，建立了利用油茶殼提取物還原金納米微粒前驅(qū)體氯金酸，“一步法”制備金納米微粒材料的新方法。通過多種技術(shù)手段對制備的材料進行表征分析。結(jié)果表明，以油茶殼提取物為還原劑，在溫和條件下即可實現(xiàn)金納米微粒的快速制備，反應(yīng)過程中隨著油茶殼提取物加入量的增加，所得的金納米微粒的粒徑逐漸減小，微粒之間的聚集作用逐漸減弱，單分散性也逐漸