水產(chǎn)品中生物胺的測定及產(chǎn)組胺菌的分離與鑒定.pdf

1、生物胺是一類重要的生理活性物質(zhì)，主要由對(duì)應(yīng)氨基酸在微生物脫羧酶作用下產(chǎn)生。但是，當(dāng)人體攝入過量生物胺后，會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的中毒癥狀。因此，本論文采用柱前衍生-高效液相色譜（HPLC）法測定了水產(chǎn)品中幾種生物胺的含量，并考察了不同貯藏條件下水產(chǎn)品中生物胺含量與微生物生長的關(guān)系。此外，分離、鑒定了藍(lán)圓鲹中產(chǎn)組胺菌的種類，并測定其產(chǎn)胺能力。
　　本論文主要由以下三個(gè)部分組成：
　　第一部分，建立了水產(chǎn)品中多種生物胺的丹磺酰氯柱前衍生-H

2、PLC-DAD檢測方法，并用該方法測定了9種水產(chǎn)品中7種生物胺（包括色胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、亞精胺和精胺）的含量。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，7種生物胺能在20 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)良好的分離，平均加標(biāo)回收率為90.3％~102%，方法的檢出限為0.02~0.26 mg/kg。結(jié)果表明：大多數(shù)樣品中生物胺的總量較低，腐胺、尸胺、組胺和酪胺是被測水產(chǎn)品的主要生物胺，但實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)個(gè)別藍(lán)圓鲹樣品的組胺含量最高可達(dá)577 mg/kg。
　　第二部分，

3、研究了不同貯藏條件下水產(chǎn)品中生物胺的含量與微生物生長的關(guān)系?？疾炝怂{(lán)圓鲹、金線魚、帶魚和章魚在﹣20°C、0°C、4°C和25°C下生物胺含量的變化，并測定了藍(lán)圓鲹和章魚在4°C和25°C下微生物的數(shù)量。結(jié)果表明：除在﹣20°C下樣品中生物胺的含量變化不顯著外，均隨著貯藏溫度的升高和貯藏時(shí)間的延長而顯著增大（p<0.05），藍(lán)圓鲹和章魚在4°C和25°C下微生物數(shù)量也隨貯藏溫度的升高和貯藏時(shí)間的延長而顯著增多。同時(shí)發(fā)現(xiàn)在貯藏過程中樣品的

4、微生物數(shù)量與腐胺、尸胺、組胺和酪胺的含量呈正相關(guān)性（R2>0.8），但章魚中組胺的含量與其無相關(guān)性。
　　第三部分，研究了藍(lán)圓鲹中產(chǎn)組胺菌的種類及其產(chǎn)胺能力。采用組胺篩選培養(yǎng)基從冰鮮藍(lán)圓鲹魚肉中分離產(chǎn)組胺菌，利用HPLC測定各分離菌株的產(chǎn)胺能力，通過測定細(xì)菌的16S rDNA序列并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹鑒定其種屬。結(jié)果表明：共有9株細(xì)菌（記為H1~H9）被分離出來，其中H8菌株的產(chǎn)組胺能力最強(qiáng)，在TSBH培養(yǎng)基（含1.0%組氨酸）中可產(chǎn)組

5、胺達(dá)115 mg/L，而其它菌株的產(chǎn)組胺能力較弱（13.0~20.4 mg/L）。同時(shí)發(fā)現(xiàn)這9株細(xì)菌除了可產(chǎn)組胺外，還產(chǎn)生多種生物胺（如腐胺、尸胺、酪胺等）。此外，鑒定結(jié)果表明，這9株細(xì)菌大多屬于G－菌，它們分別為Arthrobacter bergeri（H1）、Pseudomonas sp.（H2、H5和H6）、Psychrobacter sp.（H3）、Shewanella baltica（H4和H7）和Aeromonas salm