新型農(nóng)藥殘留速測(cè)卡的研制及檢測(cè)應(yīng)用.pdf

1、相對(duì)于農(nóng)藥殘留確證分析的色譜法，農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法因具有快速、簡(jiǎn)易等優(yōu)點(diǎn)，在發(fā)展中國(guó)家的食品安全保障中應(yīng)用廣泛。其中以酶抑制法為原理的試紙條檢測(cè)方法已作為我國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T 5009.199）。然而現(xiàn)有的試紙條存在需要溫度控制、依賴人工操作使折疊酶片與底物片反應(yīng)、反應(yīng)不充分等嚴(yán)重缺陷，直接導(dǎo)致實(shí)際檢測(cè)中的樣品量小、操作繁瑣、結(jié)果誤判等，限制了該方法的推廣應(yīng)用。
　　 本論文在已獲得高靈敏度、高穩(wěn)定性重組黑腹果蠅乙酰膽堿酯

2、酶的基礎(chǔ)上，模擬側(cè)向流動(dòng)檢測(cè)原理，尋找合適的底物和可見顏色變化，設(shè)計(jì)一種新型的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)試紙條；進(jìn)而對(duì)酶和底物的固定基質(zhì)、酶的固定化條件、酶和底物的最適濃度、酶與樣品反應(yīng)時(shí)間、顯色反應(yīng)時(shí)間等進(jìn)行了大量?jī)?yōu)化。最后對(duì)其檢出限、檢測(cè)時(shí)間、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行了分析評(píng)價(jià)。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本速測(cè)卡中的生化反應(yīng)在液態(tài)的環(huán)境下進(jìn)行，使反應(yīng)更為充分；無色底物吲哚酚乙酸酯的水解產(chǎn)物吲哚酚自氧化產(chǎn)生藍(lán)色的靛藍(lán)，適合作為肉眼觀察檢測(cè)結(jié)果的

3、顯色劑；陽性樣品呈無色，而陰性樣品呈藍(lán)色。當(dāng)固定酶量為3 U、明膠濃度為0.6％時(shí)，底物量為4 mg時(shí)，效果較好。3 μg/L敵敵畏、50 μg/L丁硫克百威、10 μg/L敵百蟲、0.4 mg/L氧化樂果可有效抑制酶活。該速測(cè)卡對(duì)敵敵畏、丁硫克百威、敵百蟲、甲萘威的檢測(cè)靈敏度優(yōu)于現(xiàn)有的天河綠洲試紙條。此外，在4℃下保存30周后仍然有效。
　　 因此，本論文研制出的農(nóng)藥殘留速測(cè)卡，使用更方便，檢測(cè)靈敏度更高，滿足現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的限