碳納米管固定脂肪酶用于1-苯基乙醇的拆分.pdf

1、1-苯乙醇是一種重要的有機(jī)合成原料，有兩個(gè)對(duì)映體（R，S-1-苯乙醇）。本文的主要研究?jī)?nèi)容是利用固定化脂肪酶拆分1-苯乙醇及其動(dòng)力學(xué)研究。 本論文對(duì)交聯(lián)法制備固定化酶的方法和條件進(jìn)行了初步探索。利用氧化多壁碳納米管（MWNT）為固定化載體，以N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）和1-（3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（EDAC）為交聯(lián)劑，在pH6．2的嗎啉乙磺酸（MES）緩沖液中，將Candida． sp99-125脂肪酶

2、（CSL）成功交聯(lián)在多壁碳納米管上，通過元素分析測(cè)定固定化酶的最大負(fù)載量為1．8mg CSL/mg MWNT，根據(jù)橄欖油乳化液水解滴定法測(cè)定固定化酶相對(duì)酶活收率達(dá)63%，由圓二色性光譜和傅里葉紅外光譜測(cè)定固定化酶相對(duì)二級(jí)結(jié)構(gòu)保持率為61．3%。 實(shí)驗(yàn)以正庚烷為溶劑，乙酸乙烯酯為?；w，在有機(jī)相中α-苯乙醇與乙酸乙烯酯在固定化脂肪酶（MWNT-CSL）的催化下發(fā)生轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)，利用固定化脂肪酶的高度對(duì)映體選擇性，R-1-苯乙醇發(fā)生

3、轉(zhuǎn)酯化生成R-1-乙酸苯乙酯，剩余未反應(yīng)的底物為S-1-苯乙醇，反應(yīng)混合物可以比較容易的進(jìn)行分離，以而實(shí)現(xiàn)拆分1-苯乙醇的目的。 實(shí)驗(yàn)中利用帶手性柱的液相色譜儀Shimadzu10AVP來定量分析反應(yīng)過程底物及產(chǎn)物的濃度變化，并計(jì)算各自的對(duì)映體過剩量e．e．s和底物轉(zhuǎn)化率C。 本論文確立了以正庚烷為溶劑，乙酸乙烯酯為酰基載體的酶催化轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)體系?？疾炝瞬煌姆磻?yīng)溫度、酰基載體與底物摩爾比對(duì)反應(yīng)的影響，并對(duì)該酶的反應(yīng)條件