Blakeslea trispora發(fā)酵制備番茄紅素的研究.pdf

1、越來越多的體內(nèi)和體外的臨床研究報告說明，番茄紅素對腫瘤細胞的生長有高效的抑制能力，同時能夠保護人們免受心血管疾病、冠狀動脈心臟病及癌癥等的侵?jǐn)_，此外，番茄紅素還常應(yīng)用在食品營養(yǎng)、添加劑、藥物及化妝品等領(lǐng)域，具有極為廣闊的市場前景。Blakeslea trispora是現(xiàn)階段唯一一種可以大批量發(fā)酵生產(chǎn)天然番茄紅素的菌種，但是其在傳代過程中極其容易發(fā)生退化現(xiàn)象，從而使番茄紅素的產(chǎn)量減少。因此，本實驗采用了紫外誘變方法及等離子體(ARTP)誘

2、變方法對Blakeslea trispora進行定向選育，并對這兩種誘變方法進行對比。同時，針對Blakeslea trispora的代謝途徑中添加合適的阻斷劑，能夠起到阻斷環(huán)化反應(yīng)途徑，從而大量積累番茄紅素的作用，推測阻斷劑可能會對環(huán)化酶的活性基因轉(zhuǎn)錄水平造成影響，因此在Blakeslea trispora發(fā)酵培養(yǎng)48h后添加適量的阻斷劑（吡啶、三乙胺、煙堿、咪唑），通過熒光定量PCR方式考察基因的轉(zhuǎn)錄水平，驗證我們的猜想。
　

3、　 通過實驗，得到了以下結(jié)論:
　　 (1)通過紫外誘變的Blakeslea trispora正、負優(yōu)勢菌株發(fā)酵后，番茄紅素產(chǎn)量提高了19.77％，正、負菌變異系數(shù)分別為4.61％和23.78％，說明紫外誘變對正、負菌產(chǎn)番茄紅素能力均有積極作用，且獲得的正菌穩(wěn)定性很好，不易退化，但負菌穩(wěn)定性差，易退化。
　　 (2)通過等離子體誘變的BIakeslea trispora正、負優(yōu)勢菌株發(fā)酵后，番茄紅素產(chǎn)量提高了56.63

4、％，負菌正突變性十分顯著。正、負菌變異系數(shù)分別為2.08％和2.41％，說明正、負菌穩(wěn)定性均很好，不易退化。
　　 (3)對比兩種誘變方法，證實等離子體誘變方法在菌種的正突變及穩(wěn)定性方便均優(yōu)于紫外誘變。
　　 (4)發(fā)現(xiàn)了一些金屬離子能夠促進菌體生長從而提高番茄紅素的產(chǎn)量。
　　 (5)經(jīng)過熒光定量實驗證實，吡啶、咪唑、三乙胺和煙堿對Blakesleatrispora代謝途徑中的關(guān)鍵基因carRA的轉(zhuǎn)錄水平均有不