納米金對P450酶抑制機理的研究.pdf

1、隨著納米技術(shù)的發(fā)展，金納米粒子因其特殊性能已成功應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，如艾滋病、腫瘤和帕金森氏癥等疾病的治療;另外，越來越多的含金納米粒子的商品出現(xiàn)在貨架上，使得人體通過皮膚、肺、胃腸道接觸到它并且造成健康傷害的機會增高。作為一種特殊的外源物質(zhì)，金納米粒子一旦進入機體，就會與細胞色素P450酶(CYPs)接觸。CYPs是一個含有多種亞型的超家族酶系，主要在肝臟表達，在大多數(shù)環(huán)境毒物、藥物代謝和解毒中扮演著重要角色。因此，深入研究納米金與C

2、YPs相互作用及其生物暴露對CYPs的功能影響有重要意義，目前此方面的研究較少。本論文探討了納米金粒子對人肝微粒體中主要CYP同工酶介導的I相藥物代謝的影響及其機理，開展了以下工作:
　　(1)為了評價CYP同工酶的活性變化，建立了一個能同時定量六種代謝物的LC-MS/MS分析方法，并考察了此方法的準確性與精密度。同時，采用了一種簡便且高效的生物樣品前處理方法，即鹽誘導分離納米粒子，經(jīng)此方法處理后，生物樣品可直接進入LC-MS/M

3、S分析。
　　(2)以六種藥物為探針底物，在體外孵育體系中，系統(tǒng)考察了不同尺寸的金納米粒子(5～100nm)對5種CYP同工酶的生物轉(zhuǎn)化活性的影響，發(fā)現(xiàn)納米金對2C9、2C19、2D6、3A4有明顯抑制作用，且抑制作用呈尺寸和濃度依賴的特點，即隨納米金粒徑減小或濃度增大而增強。
　　(3)為探討抑制機理，在微粒體孵育動態(tài)過程中，采用紫外-可見光譜、動態(tài)光散射、zeta電位表征了納米金的表面性質(zhì)及其改變，發(fā)現(xiàn)孵育過程中，納米金