SPR生物傳感器的構(gòu)建及對(duì)檸檬黃和蘇丹紅I的檢測(cè).pdf

1、隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，人們對(duì)食品的安全和質(zhì)量的要求越來(lái)越高。與此同時(shí)，因合成色素而引發(fā)的食品安全問(wèn)題頻繁發(fā)生。大量的研究報(bào)告指出，幾乎所有的合成色素都不能向人體提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，某些合成色素甚至因?yàn)楹斜江h(huán)、R-N=N-R鍵或氧雜蒽等結(jié)構(gòu)的化合物，還會(huì)轉(zhuǎn)化成致癌物質(zhì)而危害人體健康。對(duì)此，世界各國(guó)對(duì)合成色素的使用都作出嚴(yán)格規(guī)范。然而，近幾年來(lái)在世界范圍內(nèi)，如蘇丹紅事件、檸檬黃饅頭等食品安全事件屢屢發(fā)生，引起了全世界的關(guān)注

2、。因此建立快捷、簡(jiǎn)便、靈敏的檢測(cè)合成色素的方法成為了科研人員的首要工作。
　　表面等離子體共振(Surface Plasmon Resonanc，SPR)技術(shù)的問(wèn)世為人們提供了一種新的研究手段。表面等離子共振檢測(cè)技術(shù)是一種無(wú)需標(biāo)記、實(shí)時(shí)在線和靈敏度高的快速檢測(cè)技術(shù)，因其獨(dú)特的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)被廣泛的應(yīng)用于食品安全領(lǐng)域。
　　本研究采用SPR生物傳感器檢測(cè)橙色飲料中的檸檬黃含量，主要圍繞檢測(cè)中的幾項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題進(jìn)行研究，并通過(guò)對(duì)檸檬黃

3、的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法的可行性。同時(shí)利用SPR生物傳感器檢測(cè)蘇丹紅Ⅰ與β-環(huán)糊精的相互作用，探討了二者作用機(jī)理。
　　首先，本文介紹了色素的作用、分類(lèi)和危害，并且分別詳細(xì)的介紹了檸檬黃和蘇丹紅Ⅰ。著重介紹了生物傳感器和SPR生物傳感器的發(fā)展、原理和特點(diǎn)。還針對(duì)SPR生物傳感器的應(yīng)用和發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行了進(jìn)一步的介紹。
　　其次，針對(duì)檢測(cè)的對(duì)象檸檬黃小分子的特點(diǎn)，通過(guò)抗原與抗體的特異性結(jié)合，采用競(jìng)爭(zhēng)法進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程包括:檸檬黃半抗原

4、的制備、酸度對(duì)檢測(cè)體系的影響，樣品預(yù)處理方法，干擾實(shí)驗(yàn)，樣品的檢測(cè)，方法的對(duì)比等幾項(xiàng)研究。運(yùn)用分子自組裝技術(shù)，對(duì)SPR生物傳感器芯片進(jìn)行修飾，使用巰基丙酸(MPA)作為基底膜，成功將制備出的檸檬黃-牛血清白蛋白偶聯(lián)物結(jié)合到傳感器芯片上。利用抗體與抗原的特異性結(jié)合，通過(guò)溶液競(jìng)爭(zhēng)法實(shí)現(xiàn)了檸檬黃的檢測(cè)。建立了檢測(cè)檸檬黃的標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)限為12.80μg/L;獲得了pH為7.4的適宜體系酸度。同時(shí)檢測(cè)了樣品橙色飲料中的檸檬黃含量。與紫外檢測(cè)法相

5、對(duì)比，此方法對(duì)檸檬黃表現(xiàn)出更高選擇性和更好的靈敏度。
　　最后，運(yùn)用分子自組裝技術(shù)，本文還構(gòu)建了鍵合SH-β-CD的功能型SPR生物傳感器，并且利用構(gòu)建的傳感器研究了β-CD與蘇丹紅Ⅰ相互作用。結(jié)果表明在實(shí)驗(yàn)的濃度范圍內(nèi)SPR傳感器信號(hào)對(duì)蘇丹紅Ⅰ濃度的對(duì)數(shù)有良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.9952。通過(guò)紫外光譜法和紅外光譜法表征制備的蘇丹紅Ⅰ-β-CD結(jié)合物，探討β-CD與蘇丹紅Ⅰ相互作用的機(jī)理。同時(shí)利用電化學(xué)交流阻抗進(jìn)一步表征了構(gòu)