小分子及細(xì)胞檢測(cè)的生物傳感器研究.pdf

1、湖南大學(xué)碩士學(xué)位論文小分子及細(xì)胞檢測(cè)的生物傳感器研究姓名：周振華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：楚霞20090528小分了及細(xì)胞的生物7 々感器研究A b s t r a c tP h y t o h o r m o n ei S a n a t u r a ls u b s t a n c ew h i c h c a nr e g u l a t et h eli f e c o u r s ea n d t h ep h

2、 y s i o l o g i c a l a c t i v i t i e d o fp l a n t ．P h y t o n o r m o n e r e s e a r c h i s v e r y s i g n i f i c a n t t oa g r i c u l t u r e ，h o r t i c u l t u r ea n d o t h e rr e l a t e d f i e l d s

3、 ，a n dc a l l sf o rar a p i d ，p r e c i s ea n dc o n v e n i e n t m e a s u r e m e n t p r o c e d u r e d u e t o t h e l i m i t e d o f t h e t r a d i t i o n a lp h y t o h o r m o n a l a n a l y s i s ．U s e

4、 o fc h e m o ／b i o s e n s i n gt e c h n i q u e st o d e t e c tt h em e a n i n g f u lb i o ·m a r k e r sf o rt h e a c c u r a t ea n dr a p i d d i a g n o s i so f c l i n i c a ld i s e a s e sa sw e l la

5、 sf o rt h ef i e l ds c r e e n i n ga n dm a s sm o n i t o r i n go f t h ee p i d e m i cd i s e a s e s h a sb e e nan o v e l ，a t t r a c t i v ea n dh o tt o p i ci nt h ec u r r e n tm e d i c a ls t u d i e s ．

6、A p t a m e rh a v eb e e nw i d e l yr e s e a r c h e da n d u s e dn o w ．A p t a m e r a r ei s o l a t e df r o mr a n d o m —s e q u e n c en u c l e i c a c i d l i b r a r i e sb y “i nv i t r os e l e c t i o n

7、”．T h e y a r e s y n t h e t i co l i g o n u c l e o t i d e sw i t hh i g hb i n d i n g a f f i n i t yf o r a b r o a dr a n g eo f t a r g e t s ，i n c l u d i n gs m a l lm o l e c u l e s ，p r o t e i n s ，o r e

8、v e nw h o l e c e l l s ．I nt h i sp a p e r ，t h ed e t a i lm a t e r i a l sa r es u m m a r i z e da sf o l l o w s ：( 1 ) E s t a b l i s h m e n t o f i c E L l S A - k i t f o r t h ed e t e r m i n a t i o n o f

9、 a b s c i s i ca c i dI nc h a p t e r2 ，w es y n t h e s i z e dt h eA B A —B S A C O n j u g a t ec o a t i n gE L I S A p l a t e s ．Ai n d i r e c tc o m p e t i t i v ee n z y —l i n k e di m m u n o s o r b e n t

10、a s s a y ( i c E L I S A ) - k i tw a s d e v e l o p e df o rt h e q u a n t i t a t i v ed e t e r m i n a t i o n t oA B A ．T h e r e s u l ts h o w e dE L I S A - k i t w a s s i m p l e ，r a p i d ，s e n s i t i v

11、e 。T h el i n e a rr a n g e o f t h ea s s a y w a s b e t w e e n10n g ／m L ～1 0 0 0 n g ／m L ，w i t h t h ed e t e c t i o nl i m i tb e i n g 1 ．4 n g ／m L ，w h i c hd e m o n s t r a t e dt h er e l i a b i l i t ya

12、 n dp r a c t i c a l f e a s i b i l i t yo f t h e s ep r o p o s e d a g r i c u l t u r ep r a c t i c e ．( 2 ) A p t a m e r - b a s e d b i o s e n s o r a s s a ys y s t e m sI nc h a p t e r3 , ah o m o g e n e o

13、 u s ，c o l o r i m e t r i cs y s t e mf o ra d e n o s i n ed e t e c t i o nh a sb e e n d e v e l o p e db a s e do n t h e a g g r e g a t i o no fg o l d n a n o p a r t i c l e s i n d u c e d b y t h ea d e n o s

14、 i n e b i n d s s p e c i f i c a l l y t o t h e a p t a m e r p r o b e p r o b e ．E x c e l l e n t r e s p o n s ec h a r a c t e r i s t i c s ( f o re x a m p l e ，s e n s i t i v i t y ，s e l e c t i v i t ya n d

15、l i n e a rr e s p o n s er a n g e ) a r eo b t a i n e du s i n g e i t h e rU V ／v i s s p e c t r o p h o t o m e t e r o rt h en a k e d e y e ．I nc h a p t e r4 ，am e t h o df o r t h er a p i dd e t e c t i o no f

16、 l e u k e m i a c e l l si nw h o l e b l o o ds a m p l e s h a s b e e n d e v e l o p e d b a s e d o n a g r o u p o f a p t a m e r s f o r t h e s p e c i f i cr e c o g n i t i o n o fl e u k e m i ac e l l s a n

17、 dt h e s e n s i t i v e p i e z o e l e c t r i c c r y s t a l s e n s o r ．T h ed e v e l o p e dm e t h o di s e x p e c t e dt o h o l dg r e a tp r o m i s ei n m e d i c a ld i a g n o s t i c sd u et ot h e e a

18、s eo f i m p l e m e n t a t i o n ，h i g hs e n s i t i v i t ya n d s p e c i f i c i t y ．K e y w o r d s ：p h y t o h o r m o n e ； i c E L I S A ；p i e z o e l e c t r i c s e n s o r ；a p t a m e r ；n a n o p a r t