烏龍茶多酚及其兒茶素單體的降脂減肥作用研究.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，人們物質(zhì)生活水平的不斷提高，肥胖成為當(dāng)今社會(huì)常見(jiàn)和多發(fā)性疾病，也是世界衛(wèi)生組織確定的疑難性疾病之一。我國(guó)城市有10％-15％的發(fā)病率，而且有逐年上升和年輕化的趨勢(shì)，尋找高效的降脂藥物已成為醫(yī)學(xué)界的共同愿望。目前市場(chǎng)上有品種繁多的降脂減肥藥，而且不斷有新的藥物問(wèn)世，但大都是化學(xué)制劑，有的藥物能明顯地帶來(lái)一些毒副作用，例如會(huì)產(chǎn)生不同程度的肝損傷，有的合成類(lèi)藥物毒副性小，但效果不佳。肥胖高脂血癥者需要終身服藥治療，因此

2、越來(lái)越多的人把目光投向天然降脂減肥藥的開(kāi)發(fā)和利用。
　　 茶葉作為一種天然的飲料，有著幾千年的飲用歷史?，F(xiàn)代研究結(jié)果證明茶葉有很好的降脂減肥效果，未發(fā)現(xiàn)有任何毒副作用，有不少茶學(xué)界和醫(yī)學(xué)界的科學(xué)工作者都在此領(lǐng)域作了細(xì)致的研究。而烏龍茶作為一種半發(fā)酵型的茶葉，在各種研究報(bào)道中都有著顯著的降脂減肥作用。
　　 本論文以提取的烏龍茶多酚及兒茶素單體EGCG和EGCG3(")Me為研究樣品，對(duì)烏龍茶多酚的降脂減肥作用進(jìn)行了研究。

3、通過(guò)研究對(duì)營(yíng)養(yǎng)肥胖型大鼠的降脂減肥作用、與α-淀粉酶的相互作用以及對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖和分化的抑制作用，證明了烏龍茶多酚及其兒茶素單體的降脂減肥作用。
　　 1.烏龍茶多酚及其兒茶素單體的分離及純化。從特定品種的烏龍茶中，分離純化得到以酯型兒茶素為主的茶多酚混合物、EGCG單體及EGCG3(”)Me單體。選取適當(dāng)?shù)拇罂讟?shù)脂吸附烏龍茶多酚，用水沖洗去除咖啡堿后，乙醇解吸附，可得到純度較高的以酯型兒茶素為主的茶多酚混合物。

4、再對(duì)茶多酚混合物上樣，過(guò)特定的大孔樹(shù)脂，以乙醇洗脫并分部收集，即可得到純度大于95％的EGCG和EGCG3(”)Me單體。
　　 2.烏龍茶多酚對(duì)營(yíng)養(yǎng)型肥胖大鼠的降脂減肥作用。以茶多酚為樣品，研究烏龍茶多酚對(duì)營(yíng)養(yǎng)型肥胖大鼠的降脂減肥作用。體重約50 g的SD大鼠，隨機(jī)分組為正常對(duì)照組、肥胖對(duì)照組和烏龍茶組。正常對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)，肥胖對(duì)照組和烏龍茶組以高脂飼料喂養(yǎng)。同時(shí)對(duì)烏龍茶組大鼠灌胃給樣，正常對(duì)照組和肥胖對(duì)照組灌蒸餾水對(duì)照

5、。7周后宰殺取血清和肝組織。測(cè)定血脂四項(xiàng)(TC、TG、HDL-C和LDL-C)、脂肪酶、SOD酶及MDA等指標(biāo)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，烏龍茶多酚能明顯改善肥胖大鼠的各種生化指標(biāo)，使其雖每天食用高脂飼料，但各項(xiàng)指標(biāo)均好于肥胖對(duì)照組，接近于正常對(duì)照組的大鼠狀態(tài)，證明其具有明顯的降脂減肥功效。
　　 3.烏龍茶多酚與α-淀粉酶的相互作用。以烏龍茶多酚、EGCG和EGCG3”Me單體為樣品，研究其對(duì)α-淀粉酶活性的抑制作用和樣品與α-淀粉酶相

6、互作用后的紫外和熒光猝滅作用。通過(guò)DNS法測(cè)定麥芽糖含量間接測(cè)定了α-淀粉酶的活性，以及樣品抑制劑對(duì)α-淀粉酶活性的抑制率和抑制類(lèi)型等。確定了烏龍茶多酚和EGCG對(duì)α-淀粉酶的抑制作用均為競(jìng)爭(zhēng)性抑制，而EGCG3”Me為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。在紫外分光光度計(jì)測(cè)定下，三種樣品對(duì)α-淀粉酶的作用均能使其產(chǎn)生結(jié)構(gòu)的變化，發(fā)生紅移。通過(guò)熒光分光光度計(jì)，分析了α-淀粉酶的3D熒光圖譜和加入樣品后對(duì)α-淀粉酶結(jié)構(gòu)的影響，進(jìn)一步分析了樣品對(duì)酶的猝滅作用類(lèi)型等

7、。其結(jié)果表明，三種樣品均有良好的對(duì)α-淀粉酶的抑制作用和猝滅作用。
　　 4.烏龍茶多酚對(duì)3T3-L1前體脂肪細(xì)胞的增殖和分化的抑制作用。主要研究的是茶多酚混合物、EGCG和EGCG3”Me單體對(duì)3T3-L1細(xì)胞的增殖和分化的抑制作用。通過(guò)對(duì)細(xì)胞的培養(yǎng)及MTT實(shí)驗(yàn)，測(cè)定了三種樣品分別在處理24 h、48 h、72 h和96 h后的增殖情況。并通過(guò)加入胰島素、DEX和IBMX誘導(dǎo)細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞的同時(shí)加入樣品，來(lái)檢測(cè)樣品能否抑制