瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)的高密度培養(yǎng)以及S層蛋白質(zhì)提取條件的優(yōu)化.pdf

1、瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)，是乳酸桿菌屬內(nèi)的一種產(chǎn)乳酸的桿狀細(xì)菌。越來越多的研究表明瑞士乳桿菌具有健康促進(jìn)作用，例如能夠抑制腸道中病菌侵染、提高對(duì)病原菌的抗病力、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫能力和改善胃腸道正常菌群等益生作用。瑞士乳桿菌細(xì)胞表面覆蓋了一層由單個(gè)蛋白亞基或糖蛋白組成的單層晶格結(jié)構(gòu)。隨著對(duì)S層蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、化學(xué)、遺傳和裝配的研究，越來越多的信息表明其在微載體、診斷裝置、生物傳感器、疫苗以及標(biāo)記和輸送系統(tǒng)上

2、有廣泛的應(yīng)用前景。
　　本論文首先以乳酸菌培養(yǎng)基(MRS)為基礎(chǔ)，針對(duì)MRS培養(yǎng)基中的碳源、氮源篩選出最適碳、氮源，再對(duì)培養(yǎng)基中碳氮比和緩沖體系進(jìn)行了優(yōu)化，探索最適合瑞士乳桿菌菌株發(fā)酵的培養(yǎng)基成份;然后對(duì)發(fā)酵溫度、接種量、培養(yǎng)方式和發(fā)酵pH值進(jìn)行了優(yōu)化，確定了瑞士乳桿菌的最佳培養(yǎng)條件;最后對(duì)瑞士乳桿菌的S層蛋白質(zhì)提取條件中的菌體收獲時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化。經(jīng)優(yōu)化后的發(fā)酵液中的活菌數(shù)和提取的S層蛋白質(zhì)的量都有所提高。本論文的主要結(jié)果如下:<

3、br>　　1、在搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中通過單因子實(shí)驗(yàn)對(duì)瑞士乳桿菌培養(yǎng)基的主要成份進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)酵母粉和葡萄糖的促進(jìn)菌體生長的效果分別明顯高于其他碳、氮源，然后通過調(diào)節(jié)C/N比值使之獲得較好的增菌效果;乙酸鈉、磷酸氫二鈉和磷酸氫二鉀作為唯一緩沖鹽成份時(shí)比其他緩沖鹽的增菌效果較好，然后對(duì)這三種緩沖鹽進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，確定了優(yōu)化培養(yǎng)基中的緩沖鹽成份。優(yōu)化后的培養(yǎng)基成份為:酵母粉14.1 g/L，乙酸鈉8.12 g/L，磷酸氫二鈉9.94 g/L，磷酸

4、氫二鉀18.61g/L，吐溫801.0 g/L，牛肉膏10.0g/L，葡萄糖15.0 g/L，MgSO4·7H2O0.2 g/L，MnSO4·H2O0.05 g/L?；罹鷶?shù)到達(dá)9.4×108 CFU/mL，比優(yōu)化前提高了大約2.7倍。
　　2、在優(yōu)化的最佳培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，通過單因子實(shí)驗(yàn)確定了瑞士乳桿菌在搖瓶中最佳發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度37℃，接種量5％，靜置發(fā)酵;然后在此基礎(chǔ)上對(duì)發(fā)酵罐的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定為:發(fā)酵罐溫度37℃，接