山竹殼中原花青素的提取純化與活性研究.pdf

1、本研究以山竹殼為實(shí)驗(yàn)材料，采用響應(yīng)面法對(duì)山竹殼中原花青素的微波提取條件進(jìn)行優(yōu)化，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂、Sephadex LH-20凝膠柱層析進(jìn)行提取物的純化分離，建立了山竹殼原花青素的高效液相色譜分析的分離條件，并對(duì)大孔吸附樹(shù)脂純化產(chǎn)物的體外抗氧化活性和抑制腫瘤細(xì)胞活性進(jìn)行了探討。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　為優(yōu)化山竹殼原花青素的微波輔助提取工藝，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法建立了該方法的二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型，并得到了最優(yōu)提取條件：乙醇

2、濃度74％，液料比15:1，浸提溫度67℃，理論浸出率為27.43%。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明該條件下實(shí)際值為27.26%，與理論值誤差為0.62%，說(shuō)明該二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型可靠。
　　靜態(tài)吸附解吸和動(dòng)態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)表明，大孔吸附樹(shù)脂XDA-7對(duì)山竹殼原花青素具有良好的吸附和解吸性能。大孔吸附樹(shù)脂分離純化山竹殼原花青素的最佳純化條件是：吸附流速2BV/h，使用6BV用量60%的乙醇作為洗脫劑，解吸流速為2BV/h。在此條件下純化后的樣品經(jīng)鹽酸-

3、香草醛檢測(cè)濃度為66.20%。經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂XDA-7初步分離得到的粗提物再經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離，收集得到4個(gè)組分。
　　山竹殼原花青素的HPLC分析條件為：Symmetry RC18色譜柱（4.6×150mm，5μm），流動(dòng)相A為0.4%的乙酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈，設(shè)定洗脫流速為lmL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μL，梯度程序?yàn)椋?-5min，A：95%；5-12min，A：95%-88%；12-27

4、min，A：88%-81%；27-40min，A：81%-95%；40-50min，A：95%；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。在此條件下可對(duì)山竹殼原花青素粗提物得到較好的分離效果。經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱純化得到的4個(gè)組分在此HPLC分析條件下檢測(cè)，結(jié)果表明有兩個(gè)組分較為單一，對(duì)這兩個(gè)組分繼續(xù)進(jìn)行HPLC-MS定性檢測(cè)，分別為(-)-表兒茶素和B-型原花青素三聚體。
　　山竹殼原花青素粗提物對(duì)DPPH、O2-·和·OH均有一定的