應(yīng)用ELISA方法對(duì)廣西種豬場(chǎng)豬偽狂犬病流行現(xiàn)狀調(diào)查及凈化研究.pdf

1、豬偽狂犬病(Pseudorabies，PR)是由皰疹病毒科豬皰疹病毒I型偽狂犬病毒(Pseudorabiesvirus，PRV)引起豬的一種急性傳染病。1910年，Schmiedhofer通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明引發(fā)PR的病原是一種病毒。PR一年四季均可發(fā)生，但以寒冷的冬季和春季和妊娠母豬生產(chǎn)旺季為多發(fā)病的季節(jié)。豬感染PRV后表現(xiàn)臨床、亞臨床癥狀或者潛伏感染狀態(tài)；哺乳母豬感染PRV后一周左右，其乳中可以檢測(cè)到PRV，可持續(xù)3-5天，哺乳仔豬往往因?yàn)?/p>

2、吃了帶PRV的乳汁而被感染。成年豬多數(shù)為潛伏感染，PRV很快潛伏到神經(jīng)中樞，成為隱性毒豬，當(dāng)有內(nèi)在的或者外界的應(yīng)激因素刺激豬體時(shí)，或者豬體本身的抵抗力下降時(shí)，PRV能夠大量增殖并排毒，因此豬成為PRV的主要儲(chǔ)存宿主和傳染源，這對(duì)PR的流行具有極其重要的意義。種公豬可以通過(guò)精液傳播PR。PR持續(xù)流行的重要原因種豬的隱性帶毒率偏高。PRV的gE糖蛋白是所有PRV野毒株均能表達(dá)的一種糖蛋白。gE糖蛋白缺失使PRV的毒力下降，但不會(huì)影響PRV的

3、免疫原性，以此生產(chǎn)出具有良好免疫源性的gE基因缺失疫苗，免疫豬可以產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫保護(hù)力，這為有效控制與凈化PR提供了可能性的條件。預(yù)防PR最安全實(shí)用的疫苗是基因缺失疫苗；基因缺失疫苗對(duì)各種年齡的豬群都安全，妊娠中的母豬也可以使用，不影響胎兒，并且能有效預(yù)防PR的隱性感染。PR的控制與凈化是當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)所面臨的重要課題，也是根除豬偽狂犬病的有效途徑。ELISA診斷方法具有以下的優(yōu)點(diǎn)：一是具有特異性強(qiáng)、敏感性高的特點(diǎn)；二是受檢樣品多，血清、精液

4、、唾液等可以作為樣品進(jìn)行檢測(cè)；三是檢測(cè)需要的時(shí)間不長(zhǎng)，大約3～4h內(nèi)就可得出試驗(yàn)結(jié)果；四是可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品，完全符合大范圍的血清學(xué)調(diào)查、監(jiān)測(cè)中大批量檢測(cè)樣品的需求。應(yīng)用ELISA方法進(jìn)行PR抗體檢測(cè)，能區(qū)分PRV野毒感染豬和基因缺失疫苗免疫豬，淘汰帶毒豬、培育健康種豬群為成功凈化PR提供了有利的條件。但由于多種原因，如豬偽狂犬病疫苗質(zhì)量不穩(wěn)定、防疫措施不力、動(dòng)物無(wú)序流動(dòng)、PRV毒力增強(qiáng)、PRV的潛伏感染特性、免疫程序差異、管理因素等

5、方面的原因，PR的根除無(wú)法完成，因此PR仍然是危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要疫病之一。廣西的豬場(chǎng)同樣受到PR的嚴(yán)重威脅。由于PRV的潛伏感染并能不斷向外界排毒，同一豬場(chǎng)各類豬群均有可能遭受感染。尤其是種豬一旦感染PRV后造成垂直傳播和水平傳播，是造成一個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)PRV持續(xù)感染的總根源，因此PR的凈化應(yīng)以種豬場(chǎng)為最先的重點(diǎn)，選育健康、不攜帶PRV的種豬群和后備豬群是PR凈化計(jì)劃的核心內(nèi)容。
　　 為了了解PR在廣西流行情況，2005年間對(duì)

6、廣西4家種豬場(chǎng)頭豬進(jìn)行調(diào)查，采用ELISA方法檢測(cè)PRV野毒抗體。試驗(yàn)證實(shí)了ELISA是一種靈敏性高、特異性強(qiáng)的診斷方法，且可以進(jìn)行大批量樣品。調(diào)查結(jié)果表明：廣西的種豬場(chǎng)存在PRV野毒，成為PR流行的根源；調(diào)查的4個(gè)種豬場(chǎng)共檢測(cè)2510份豬血清樣品，結(jié)果有296份為PR血清抗體陽(yáng)性，平均陽(yáng)性率為11.79％；4個(gè)種豬場(chǎng)的豬群都有不同程度地感染了PRV；其中P1場(chǎng)PR血清抗體陽(yáng)性率均超過(guò)了15％仔豬的陽(yáng)性率最高為22.66％；作為種豬場(chǎng)，

7、種公豬攜帶PRV對(duì)豬場(chǎng)的威脅極大，可以隨精液的銷售傳播給購(gòu)買豬精的豬場(chǎng)，同時(shí)對(duì)外銷售的種源后備母豬而將PR帶給引進(jìn)種豬的豬場(chǎng)，所以從種源上凈化PR意義更重大。
　　 在流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，對(duì)4個(gè)種豬場(chǎng)進(jìn)行PR免疫、監(jiān)測(cè)、淘汰陽(yáng)性豬，建立PR陰性種豬群，并綜合實(shí)施嚴(yán)格引種、合理營(yíng)養(yǎng)、提高飼養(yǎng)管理水平、控制好其它疫病、完善各項(xiàng)防疫制度、生物安全措施等技術(shù)措施，通過(guò)四年時(shí)間的凈化，可以穩(wěn)定地控制PR，陽(yáng)性率由11.98％降為0.22

8、％，降低了11.76％；使用gE基因缺失疫苗免疫豬是凈化PR的有效途徑，免疫后可以使豬體獲得堅(jiān)強(qiáng)的保護(hù)力來(lái)抵抗環(huán)境野毒的感染；應(yīng)用gE-ELISA方法檢測(cè)淘汰陽(yáng)性豬后，母豬的生產(chǎn)繁殖性能明顯提高，母豬配種分娩率從67.75％提高到了82.99％，提高了15.54％；母豬窩產(chǎn)活仔數(shù)平均增加了1.14頭；產(chǎn)仔均重增加了0.15公斤；斷服均頭數(shù)增加了1.36頭；母豬平均年產(chǎn)活仔數(shù)增加了3.08頭；哺乳仔豬死亡率下降了2.83％；母豬返情率下降

9、了14.63％。凈化PR可以提整個(gè)豬群的健康度，對(duì)種豬場(chǎng)的生產(chǎn)力有很大的促進(jìn)作用；種豬場(chǎng)的各項(xiàng)生產(chǎn)指標(biāo)得到很好的改善，其中有2個(gè)種豬場(chǎng)實(shí)施凈化PR獲得成功，達(dá)到了凈化的目的。
　　 實(shí)驗(yàn)證明，依照我們的技術(shù)路線從種豬源頭凈化開(kāi)始做到清內(nèi)源、防外源，并堅(jiān)持實(shí)施，控制PR在豬場(chǎng)中惡性傳播。這一技術(shù)路線在部分試驗(yàn)場(chǎng)的實(shí)施取得成功，說(shuō)明該技術(shù)具有一定的先進(jìn)性和可操作性，可以在全區(qū)的種豬場(chǎng)和規(guī)模豬場(chǎng)推廣應(yīng)用。各豬場(chǎng)可以結(jié)合本豬場(chǎng)的實(shí)際情況