去泛素化酶USP2a調(diào)控活化STAT1的泛素化及其抗病毒功能的機(jī)制研究.pdf

1、IFN家族是調(diào)節(jié)先天免疫以及機(jī)體抵抗病毒感染的最重要的細(xì)胞因子。IFN家族包括三大類：I型、II型和 III型。它們主要是通過激活一系列信號(hào)分子來發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，其中包括Janus激酶、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子（STAT）。STAT家族包括七個(gè)成員，其中STAT1參與所有三類IFN信號(hào)的調(diào)控。STAT1活化后形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物，進(jìn)入核內(nèi)，結(jié)合到干擾素刺激基因（ISG）的啟動(dòng)子元件ISRE上，從而誘導(dǎo)一系列ISGs的表達(dá)。STAT1活化主要是依賴

2、其蛋白上701位酪氨酸位點(diǎn)磷酸化（pY701-STAT1）。維持細(xì)胞核內(nèi)有效的pY701-STAT1水平能夠維持IFN信號(hào)和抗病毒功能。目前關(guān)于STAT1蛋白的研究主要集中在總STAT1上?？係TAT1不同的轉(zhuǎn)錄后修飾，比如：甲基化、乙?；UMO化和泛素化，都參與STAT1信號(hào)的調(diào)控。但是，詳細(xì)的機(jī)制研究仍然很貧乏。而關(guān)于泛素修飾方面，細(xì)胞因子如何誘導(dǎo)STAT1泛素化，以及STAT1泛素化在調(diào)控細(xì)胞信號(hào)中發(fā)揮怎樣的作用尚未知。細(xì)胞因

3、子比如IFN，短時(shí)間刺激細(xì)胞數(shù)小時(shí)，總STAT1蛋白仍相對(duì)比較穩(wěn)定。由此可見，在IFN活化信號(hào)的早期，總STAT1的泛素化和蛋白水平的變化對(duì)于IFN的早期信號(hào)影響并不大。如前所述，pY701-STAT1傳遞了IFN信號(hào)入核，是 IFN信號(hào)的核心和關(guān)鍵。因此，闡明活化的pY701-STAT1蛋白水平在細(xì)胞核內(nèi)是如何被調(diào)節(jié)顯得尤為重要。
　　本研究發(fā)現(xiàn)pY701-STAT1是IFN誘導(dǎo)的STAT1泛素化的主要形式，pY701-STAT

4、1能夠通過泛素蛋白酶體系統(tǒng)被降解；并且，我們發(fā)現(xiàn)泛素化的pY701-STAT1主要集中在細(xì)胞核內(nèi)，抑制pY701-STAT1的入核能有效的阻止pY701-STAT1的泛素化和蛋白降解。進(jìn)一步，我們發(fā)現(xiàn)去泛素化酶USP2a在 IFNα刺激下能夠入核，并結(jié)合到pY701-STAT1上。我們發(fā)現(xiàn)USP2a能抑制pY701-STAT1的K48位泛素化修飾和蛋白降解。更重要的是，USP2a穩(wěn)定了IFN誘導(dǎo)的pY701-STAT1水平，增強(qiáng)了三類I