Rab3A與突觸結(jié)合蛋白1相互作用的分子機(jī)制研究.pdf

1、分類號(hào)Q5學(xué)校代碼!Q5壘2密級(jí)——學(xué)號(hào)2Q12Q21壘122QRab3A與突觸結(jié)合蛋白1相互作用的分子機(jī)制研究StudyonthemolecularmechanismofinteractionbetweenRab3AandSynaptotagmin1指導(dǎo)教師姓名、職稱至豎絲塾撞湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室二零一五年五月T36N)、Rab3A的N端截短突變體[Rab3AN(180)、Rab3A的C端截短突變體[Rab3AC(8122

2、0)]的His標(biāo)簽融合蛋白。然后利用GSTPullDown實(shí)驗(yàn)分別驗(yàn)證突觸結(jié)合蛋白1兩個(gè)結(jié)構(gòu)域蛋白C2A和C2B在GTP或／和Ca2存在與否的條件與Rab3A全蛋白及其突變體之間的相互作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，突觸結(jié)合蛋白1的C2A和C2B結(jié)構(gòu)域均能與Rab3A相互作用；Ca2對(duì)它們的相互作用沒(méi)有明顯的影nI句；C2A結(jié)構(gòu)域與Rab3A的相互作用是依賴GTP的，而C2B結(jié)構(gòu)域以不依賴GTP的方式與Rab3A相互作用；C2結(jié)構(gòu)域與Rab3A相互

3、作用的結(jié)合區(qū)域在Rab3A的N端(180位氨基酸)。本研究證明：Rab3A能通過(guò)其N端序列(180位氨基酸)以不依賴于cE的方式與突觸結(jié)合蛋白1發(fā)生直接的相互作用；Rab3A與C2A結(jié)構(gòu)域的相互作用依賴GTP，而與C2B結(jié)構(gòu)域的相互作用則不依賴于GTP，提示它們的相互作用機(jī)制有所不同。本研究初步揭示了Rab3A與突觸結(jié)合蛋白1相互作用的分子機(jī)制，為探明兩者之間的相互作用對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的影響積累了新的實(shí)驗(yàn)資料。關(guān)鍵詞：突觸結(jié)合蛋白1，Ra