油用向日葵芽苗期抗旱性鑒定及SSR分子標記的研究.pdf

1、油葵芽苗期抗旱性強弱，直接關(guān)系到出苗率和幼苗的長勢，所以油葵芽苗期抗旱性鑒定及遺傳改良研究對油葵的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有非常重要的現(xiàn)實意義。近年來，分子標記技術(shù)的發(fā)展為加快作物育種進程提供了強有力的武器，但應(yīng)用于油葵的分子標記研究起步較晚。本研究利用11個油葵育種材料和K55×K58構(gòu)建的分離群體，對油葵抗旱性鑒定方法、抗旱性遺傳和SSR分子標記等進行了研究。主要研究結(jié)果如下： 1、利用室內(nèi)發(fā)芽試驗和室外盆栽試驗對11個抗旱性不同的油葵育

2、種材料的相對發(fā)芽指數(shù)、萌發(fā)抗旱指數(shù)和株高等14項抗旱性相關(guān)性狀進行了測定，并運用灰色關(guān)聯(lián)度理論，以種子萌發(fā)抗旱指數(shù)與幼苗干旱成活率的乘積作為參考數(shù)列X0，分析各指標與芽苗期抗旱性的關(guān)系，從中篩選出關(guān)聯(lián)度較大的相對發(fā)芽率、相對發(fā)芽指數(shù)、芽相對生長量、根相對生長量、相對電導(dǎo)率、相對含水量等8個指標。然后通過隸屬函數(shù)法對抗旱性進行綜合分析，定量地評價11個油葵育種材料芽苗期的抗旱性。選出抗旱性差異明顯的兩個品種K55、K58作為構(gòu)建作圖群體的

3、雜交親本。 2、F2：3群體及F1各抗旱相關(guān)性狀的表型分析表明：F2：3群體根生長量和根冠比性狀的變異系數(shù)較高，表現(xiàn)出較大的變幅；丙二醛、芽生長量和發(fā)芽率性狀的變異系數(shù)較低，表現(xiàn)出較小的變幅。除丙二醛性狀外， F2：3群體各性狀的平均表現(xiàn)均低于雙親及雜種F1。K55×K58雜交組合的親本、F1、F2丙二醛生理指標鑒定及遺傳分析結(jié)果表明：K58為強抗旱性品種，K55為弱抗旱性品種，F(xiàn)1為高抗，F(xiàn)2抗、感分離比例符合3：1，結(jié)合親本

4、在各抗旱性狀的表現(xiàn)、遺傳力大小及χ2測驗結(jié)果初步認為模擬干旱脅迫下丙二醛含量是由1～2對主效基因控制的性狀，屬于簡單遺傳的質(zhì)量性狀或主效基因控制的數(shù)量性狀，受環(huán)境影響小。 3、在DNA含量、退火溫度和循環(huán)次數(shù)上分別設(shè)置幾個水平，采用單一因素的方法，建立了一套適合油葵抗旱的SSR體系。其中2×Taq Master Mix12.5μl終濃度1×，DNA模板1μl終濃度<500ng，上下游引物均為0.5μl，終濃度0.1-1.0μM，

5、剩余用Nuclease—Free Waters補足25μl。利用該體系進行擴增，所得譜帶清晰、穩(wěn)定、非特異性帶少。 4、60對油葵SSR特異引物對雜交組合K55×K58的親本、抗感基因池進行擴增，結(jié)果表明：兩親本之間，有7對引物表現(xiàn)明顯而穩(wěn)定的多態(tài)性，多態(tài)性頻率為13.5％；其中引物ORS510、ORS317在抗感基因池間表現(xiàn)穩(wěn)定的多態(tài)性。 5、采用MAPMAKER數(shù)據(jù)分析軟件對（K55×K58） F2單株SSR擴增結(jié)果