慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛與脾胃濕熱證蛋白組學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　本課題采用同位素相對(duì)標(biāo)記與絕對(duì)定量技術(shù)（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ），探索慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證與健康正常人之間的差異表達(dá)蛋白質(zhì)，尋找慢性乙型肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證的差異蛋白表達(dá)譜，初步篩選出肝郁脾虛證、脾胃濕熱證的潛在生物學(xué)標(biāo)志物，為慢性乙型病毒性肝炎中醫(yī)證候的本質(zhì)提供現(xiàn)代化依據(jù)，推動(dòng)該病中醫(yī)證候診斷客觀化

2、的研究。
　　方法：
　　運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)iTRAQ技術(shù)對(duì)臨床單位采集的慢性乙型肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證患者及健康正常人進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測，采用SPSS19.0系統(tǒng)、Mascot鑒定軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，篩選出兩種證型可能的差異表達(dá)蛋白質(zhì)。
　　結(jié)果：
　　1．肝郁脾虛證組和健康對(duì)照組比較，共篩選出157個(gè)差異表達(dá)蛋白（P＜0.05），其中112個(gè)蛋白上調(diào)，45個(gè)蛋白下調(diào)；脾胃濕熱證組和健康對(duì)照組比較，共篩選出163個(gè)差

3、異表達(dá)蛋白（P＜0.05），其中128個(gè)蛋白上調(diào)，35個(gè)蛋白下調(diào)。
　　2．肝郁脾虛證組和脾胃濕熱證組比較，肝郁脾虛組共篩選出30個(gè)差異表達(dá)蛋白（P＜0.05），22個(gè)蛋白上調(diào)，8個(gè)蛋白下調(diào)。其中，發(fā)現(xiàn)表達(dá)差異倍數(shù)在兩倍以上的蛋白1個(gè)：TUBA1A上調(diào)表達(dá)；脾胃濕熱證組和肝郁脾虛證組比較，脾胃濕熱組共篩選出24個(gè)差異表達(dá)蛋白（P＜0.05），22個(gè)蛋白上調(diào)，2個(gè)蛋白下調(diào)。其中，發(fā)現(xiàn)表達(dá)差異倍數(shù)在兩倍以上的蛋白6個(gè)：ACTA2、AC

4、TG2、ZNF628、DEFA1、DEFA3、CaM均上調(diào)表達(dá)。
　　3.差異蛋白與課題組前期兩證型microRNA分析均表明：酶活性調(diào)節(jié)、代謝過程、細(xì)胞發(fā)育、細(xì)胞凋亡、炎癥應(yīng)答、免疫反應(yīng)等功能為慢性乙型肝炎肝郁脾虛證相關(guān)；免疫系統(tǒng)、細(xì)胞殺傷、細(xì)胞凋亡、刺激反應(yīng)、肌動(dòng)蛋白等功能可能與慢性乙型肝炎脾胃濕熱證相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1．慢性乙型肝炎肝郁脾虛和脾胃濕熱證組與健康對(duì)照組存在差異蛋白表達(dá)。
　　2．TUBA