兒童急性呼吸道感染流感嗜血桿菌耐藥性及產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶株耐藥分子機(jī)制特征分析.pdf

1、目的:調(diào)查重慶地區(qū)急性呼吸道感染患兒流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae,Hi)的感染情況及其對常用抗菌藥物耐藥性、耐藥表型特點(diǎn)。探討產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶Hi菌株blαTEM-1基因多態(tài)性與其對β內(nèi)酰胺類抗菌藥耐藥的相關(guān)性。
　　 方法:收集2006年1月至2009年12月重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院急性呼吸道感染患兒臨床資料、細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏結(jié)果,分析Hi感染和耐藥情況。PCR檢測β-內(nèi)酰胺酶基因,微量肉湯稀釋法檢測

2、隨機(jī)選取的99株blaTEM-1 PCR陽性的Hi對6種抗菌藥敏感性,SSCP和測序分析blαTEM-1基因多態(tài)性,分析Hi blαTEM-1基因流行基因型及突變型。
　　 結(jié)果:13842份病例中,Hi感染1967份,占14.2％。95.5%的Hi分布在≤5歲年齡段;40.3%Hi感染患兒合并其它致病菌感染;Hi產(chǎn)酶率達(dá)35.8%,＞5歲組的產(chǎn)酶率相對低。Hi對阿莫西林/克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢呋辛、阿奇霉素、利福平

3、、環(huán)丙沙星耐藥率低于10%;連續(xù)四年Hi對氨芐西林、四環(huán)素和氯霉素耐藥率分別為31.8%-40.0%、31.8%-36.0%、18.705%-22.7%;對復(fù)方磺胺甲嗯唑(SXT)耐藥率最高69.0%-77.4%。多重耐藥Hi達(dá)30.0%;74.1%的Hi分布在8個(gè)常見的耐藥表型;SXT最多,31.1%-34.5%,其次Amp-SXT-CHL-TET為12.6%-19.3%;產(chǎn)酶組菌株集中在氨芐西林耐藥表型。97株頭孢硝噻吩水解陽性的H

4、i均產(chǎn)TEM-1型β-內(nèi)酰胺酶,沒有ROB-1型;blαTEM-1 PCR陽性而頭孢硝噻吩水解陰性2株;74.7%的Hi株blαTEM-1基因全長PCR產(chǎn)物不是預(yù)期的1075bp。99株Hi blαTEM-1多肽性不是呈現(xiàn)在氨基酸編碼區(qū),而是在調(diào)控的編碼。99株Hi blαTEM-1啟動(dòng)子被分為SSCP1-SSCP6共6種基因型,分別為Pdel,Pa/Pb,P4,Prpt.b,2Prpt,P3.b啟動(dòng)子。首次在Hi中發(fā)現(xiàn)blαTEM-1

5、 P4啟動(dòng)子,共7株,其中6株并A182C突變。以135bp缺失的Pdel啟動(dòng)子為主要,達(dá)53.5%:其次,為198bp后插入54bp重復(fù)片段并G175A突變的Prpt.b啟動(dòng)子,占18.2%;G175 A替代的Pa/Pb啟動(dòng)子17.2%。高耐氨芐西林(MIC≥128μg/ml)菌株47.2%為Pdel.a,28.0%為Prpt.b,13.2%為Pa/Pb啟動(dòng)子;高耐頭孢丙烯(MIC≥128μg/ml)菌株集中在Pdel.a啟動(dòng)子。

6、r>　　 結(jié)論:
　　 1.≤5歲兒童是Hi感染易感人群,尤其當(dāng)免疫力下降時(shí)更易感染。
　　 2.TEM-1型β-內(nèi)酰胺酶是本地區(qū)Hi氨芐西林耐藥的主要機(jī)制。
　　 3.Hi的blαTEM基因啟動(dòng)子呈多態(tài)性,本地區(qū)存在6種blαTEM基因啟動(dòng)子;以Pdel.a,Pa/Pb和Prpt.b為流行的主要啟動(dòng)子類型。
　　 4.Pde1.a,Prpt.b和2Prpt啟動(dòng)子可能增加β-內(nèi)酰胺酶的表達(dá)而引起氨芐西林