順鉑磁性熱敏性脂質(zhì)體分子設(shè)計和組裝.pdf

1、順鉑是一種臨床常用的細(xì)胞周期非特異性強(qiáng)效抗癌藥，對于多種實體細(xì)胞瘤如黑色素瘤、頭頸部癌、非小細(xì)胞肺癌等都具有抑制細(xì)胞活性作用。盡管順鉑在治療癌癥過程中能夠起到很好的療效，但其體內(nèi)毒性較大，易引起嚴(yán)重的胃腸道反應(yīng)、腎毒性、耳毒性等毒副反應(yīng)而影響了臨床應(yīng)用。因此如何使順鉑能夠選擇性到達(dá)腫瘤細(xì)胞，降低藥物毒性提高治療效果是現(xiàn)階段研究的主要方向。
　　磁性熱敏性脂質(zhì)體是將磁性材料和藥物包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的新型靶向制劑，給藥后在身體的局部施加固

2、定磁場以增加其在局部滯留時間提高其靶向性，隨后在溫?zé)岽碳は驴焖籴尫潘幬锲鸬骄植繗Ч?，可減少對正常組織的影響，提高藥物的治療效果。
　　目的：對順鉑磁性脂質(zhì)體的分子組裝方式進(jìn)行設(shè)計，通過選用適合的磷脂前體，設(shè)計合理的制備過程，來改善脂質(zhì)體的載藥率，提高其靶向性。此外對二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)與多種金屬離子的相互作用進(jìn)行研究，探討金屬離子輔助載藥的模式和機(jī)理，為提高脂質(zhì)體的載藥率提供新的途徑。
　　方法：
　　采

3、用改良水熱合成方法一步制備表面被有機(jī)基團(tuán)修飾的Fe3O4磁性納米顆粒，對磁性顆粒進(jìn)行XRD、TEM、IR表征。以天然蛋黃卵磷脂(EPC)為原料，采用石墨爐原子吸收分光光度法測定順鉑含量，以包封率為指標(biāo)討論磁性脂質(zhì)體不同制備方法。利用薄膜分散法對影響磁性脂質(zhì)體包封率的處方因素進(jìn)行正交實驗，確定脂質(zhì)體最佳制備和處方工藝。
　　利用EPC為磷脂材料，在篩選出來的最佳制備條件下，以順鉑抗癌藥物為模型藥物，探討薄膜分散法制備脂質(zhì)體過程中磁性

4、顆粒不同的加入順序?qū)χ|(zhì)體微觀結(jié)構(gòu)的影響，即程序Ⅰ：將磁性顆粒先與磷脂結(jié)合再成膜制備脂質(zhì)體；程序Ⅱ：將磁性顆粒分散于藥物溶液中水合制備脂質(zhì)體。通過透射電鏡對脂質(zhì)體微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，尋找適合的納米磁性脂質(zhì)體的組裝方式并對其進(jìn)行體外釋放實驗。
　　以DPPC為原料，分別利用兩種程序制備順鉑磁性熱敏性脂質(zhì)體，從分子水平探討單一組分的磷脂前體對合成的脂質(zhì)體理化性質(zhì)的影響，并對脂質(zhì)體穩(wěn)定性及藥物體外釋放進(jìn)行質(zhì)量評價。通過動物實驗對磁性脂質(zhì)體

5、的磁靶向性進(jìn)行研究考察。利用差熱分析、紅外光譜和拉曼光譜對4種金屬離子(Zn2+，Cu2+，Mn2+，Mg2+)與DPPC的相互作用機(jī)理進(jìn)行分析，并制備金屬離子輔助載藥的脂質(zhì)體，探討其提高載藥率的機(jī)理。
　　結(jié)果：
　　改良水熱法制備Fe3O4磁性納米顆粒的方法不需要高溫和氮?dú)獗Ｗo(hù)，生成的粒子粒徑為8.9nm，具有超順磁性，且表面被有機(jī)基團(tuán)所修飾可提高其親油性，增加與磷脂的結(jié)合能力。
　　選用葡聚糖Sephadex G

6、-50凝膠柱對磁性脂質(zhì)體與游離藥物進(jìn)行分離。確定采用薄膜分散法制備順鉑磁性脂質(zhì)體，經(jīng)正交實驗設(shè)計篩選了制備磁性脂質(zhì)的最優(yōu)處方為EPC濃度=100 mg·mL-1；EPC：CH=7:1(w/w)；EPC：Fe3O4=5:1(w/w)；順鉑濃度=1 mg·mL-1。
　　利用EPC為磷脂材料考察兩種不同制備程序?qū)χ|(zhì)體微觀結(jié)構(gòu)的影響，透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，程序Ⅰ制備的脂質(zhì)體磁性顆粒分布于磷脂雙層中，而程序Ⅱ制備的脂質(zhì)體磁性顆粒分布于脂質(zhì)體

7、中間水相。采用程序Ⅰ制備的磁性脂質(zhì)體在藥物包封率和磁性顆粒的含量上都優(yōu)于程序Ⅱ，藥物包封率分別為34.90±3.31％和28.34±4.72％，磁性顆粒的包封率分別為4.19±1.70和3.05±3.13 mg·mL-1，同時磁性脂質(zhì)體藥物包封率均高于普通脂質(zhì)體。上述3種不同脂質(zhì)體體外釋藥均符合一級釋藥規(guī)律，能保證一定的緩釋效應(yīng)。
　　DPPC作為熱敏性磷脂材料，為保證脂質(zhì)體的熱敏性確定了以DPPC：CH為7:1制備脂質(zhì)體。程序Ⅰ

8、制備的磁性脂質(zhì)體同樣使磁性顆粒均勻分散在磷脂雙層中，并且磁性顆粒和藥物的裝載量均較高分別為33.51％±3.30％和2.34±0.09 mg·mL-1。與EPC相比，DPPC制備的磁性脂質(zhì)體囊泡粒徑較小，且均勻性和磁性顆粒在磷脂層中的分散性更好。DSC與體外熱敏釋放共同證明了順鉑磁性熱敏性脂質(zhì)體具有良好的熱敏性，并且通過動物實驗證明了其在體內(nèi)具有明顯的磁靶向，可以有效運(yùn)載順鉑至靶部位。
　　由于金屬離子與DPPC的磷脂?；鶊F(tuán)產(chǎn)生靜

9、電力作用改變了DPPC的構(gòu)象，導(dǎo)致了脂質(zhì)分子碳?xì)滏溑帕懈o密，從而使Tm升高，并且隨著金屬離子原子序數(shù)的增加，半徑減小，陽離子單位體積的電荷密度增加，金屬離子與DPPC分子間的靜電作用加強(qiáng)。金屬離子輔助載藥脂質(zhì)體的藥物包封率均明顯高于普通脂質(zhì)體，并且仍能保持著良好的熱敏釋藥性。
　　結(jié)論：以改良水熱法制備的Fe3O4磁性納米顆粒為磁性材料，通過先將磁性顆粒與磷脂相結(jié)合的方法制得到磁性顆粒能均勻分散在磷脂雙層中，且磁性顆粒和藥物的裝