有氧運動和高脂飲食對小鼠血脂代謝和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的影響.pdf

1、目的：
　　 1.探討有氧運動和高脂飲食對機體脂質(zhì)代謝的影響。
　　 2.探討有氧運動和高脂飲食對機體動脈粥樣硬化的影響。
　　 3.探討有氧運動和高脂飲食對肝臟組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激水平的影響。
　　 方法：
　　 本實驗以40只健康雄性BALB/c八周齡小鼠為實驗對象。隨機分為四組：正常飲食對照組(N組，n=10)；高脂飲食組(H組，n=10)；有氧運動組(E組，n=10)；高脂+運動組(HE組，n=

2、10)。適應性喂養(yǎng)3天后，將所有小鼠禁食12h，尾靜脈取血，分離血清，-80℃存放待測。取血后第二天開始對不同組進行不同干預：N組小鼠正常飲食自由活動；H組小鼠高脂飲食自由活動；E組小鼠正常飲食并進行無負重游泳運動；HE組小鼠高脂飲食并進行無負重游泳運動。游泳方案是：每天上午游泳1小時，每周訓練5天，共8周。所有小鼠每隔一周測量一次體重。實驗最后一天禁食12h，次日取血，分離血清。檢測實驗前后小鼠血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、

3、血糖(GLU)、神經(jīng)鞘磷脂(SM)、血乳酸(LA)的含量。取血之后用1％異戊巴比妥鈉對小鼠進行麻醉，剖開胸腔，取出肝臟和膽囊，觀察肝臟和膽囊的形態(tài)并利用WesternBlotting的方法檢測肝臟組織中的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-78(GRP78)的水平。再用4％的多聚甲醛對小鼠進行固定，分離小鼠的主動脈弓和胸腹主動脈，觀察動脈粥樣硬化(AS)斑塊情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.體重變化：實驗前，各組小鼠體重無顯著差別(P>0.0

4、5)(數(shù)據(jù)見表4-1)。
　　 8周實驗后，H組體重(前20.64±2.32、后32.72±1.44)g顯著性提高(見表4-1，圖4-1)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而E和HE組的體重雖然有所降低，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。與其它組相比E組體重顯著性提高。
　　 2.8周實驗前后，血脂水平的變化：
　　 實驗前，各組小鼠血脂各項指標水平基本相同，無顯著性差異，(P>0.05)(見表4-1)。

5、r>　　 實驗后：
　　 (1)甘油三酯(TG)的變化：
　　 與實驗前相比：N組變化不明顯(前0.88±0.29、后1.01±0.37)mmol/L，(P>0.05)；H組(前0.95±0.2、后0.64±0.16)mmol/L，含量顯著降低，(P<0.01)；E組(前0.84±0.30、后0.77±0.27)mmol/L，有所降低但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；HE(前0.82±0.17、后0.52±0.18)

6、mmol/L含量顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　 與N組相比，各組TG的含量均顯著性降低，(P<0.05)。
　　 (2)膽固醇(TC)含量的變化：
　　 與實驗相前比：N組TC變化不大(前3.36±1.21、后2.51±0.52)mmol/L，(P>0.05)；H組(前2.35±0.69、后4.46±0.45)mmol/L顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；E組TC(前2.79±0.8

7、4、后1.62±0.47)mmol/L水平顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；HE組TC(前2.17±0.39、后3.71±0.79)水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 與N組相比，H組TC含量顯著升高(2.51±0.52、4.46±0.45)mmol/L，(P<0.05)；E組顯著低于N組(2.51±0.52、1.62±0.47)mmol/L，(P<0.05)，更低于H組：(1.62±0.47、4.

8、46±0.45)mmol/L，(P<0.01)；HE組顯著低于H組(3.71±0.79、4.46±0.45)mmol/L，(P<0.05)；HE組與E相比TC含量顯著升高(3.71±0.79、1.62±0.47)mmol/L，(P<0.01)。
　　 (3)血糖(GLU)含量的變化：
　　 實驗前后，H組血糖含量(前5.30±1.84mmol、后6.27±1.25)mmol/L，升高不顯著(P>0.05)；E組血糖含量(

9、前5.07±1.33、后2.38±1.03)mmol/L，含量顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；HE組血糖含量(前5.68±1.68、后2.78±1.08)mmol/L顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；
　　 組間比較：H與N相比血糖含量有所升高，但不顯著。E與N組相比血糖含量顯著降低(2.38±1.03、5.18±1.55)mmol/L，(P<0.05)；HE組與N組相比血糖含量顯著降低，(2.78±1.0

10、8、5.18±1.55)mmol/L，(P<0.05)；HE組與H組相比血糖含量顯著降低(2.78±1.08、6.27±1.25)mmol/L，(P<0.05)；HE組與E組相比血糖含量變化不明顯(2.78±1.08、2.38±1.03)mmol/L，(P<0.05)。
　　 (4)神經(jīng)鞘磷脂的變化：
　　 實驗后：E組SM(前12.74±2.82、后9.84±2.08)mmol/L含量顯著降低，(P<0.01)；其余各

11、組實驗前后SM均無顯著性變化。
　　 與N組相比：H組SM含量升高不顯著(13.12±2.75、15.13±1.98)mmol/L，(P>0.05)；E組SM含量顯著降低(13.12±2.75、9.84±2.08)mmol/L，(P<0.05)；HE組SM含量變化不大。
　　 組間比較：HE組與H組相比SM含量變化不大(14.71±3.39、15.13±1.98)mmol/L，(P>0.05)；與E相比，HE組SM含量顯

12、著升高(9.84±2.08、15.13±1.98)mmol/L，(P<0.05)。與H相比，E組SM非常顯著性降低(15.13±1.98、9.84±2.08)mmol/L，(P<0.01)。
　　 3.血乳酸的變化：
　　 實驗前后，各組小鼠血乳酸水平?jīng)]有明顯改變，此指標用于運動強度控制的參考值。
　　 4.8周實驗后，各組小鼠解剖后通過主動脈弓和腹主動脈檢查顯示(見圖4-2，4-3)：
　　 N組：正常

13、主動脈透明、干凈，內(nèi)膜光滑，層次清晰，厚薄均勻，內(nèi)膜、中膜及外膜未見異常；沒脂質(zhì)沉淀和斑塊形成。
　　 E組：主動脈弓上沒有斑塊，很透明、干凈，內(nèi)膜光滑，層次清晰，厚薄均勻，內(nèi)膜、中膜及外膜未見異常。
　　 H組：主動脈弓不透明，內(nèi)膜不光滑，可觀察到明顯的脂質(zhì)沉積斑塊。
　　 HE組：主動脈弓跟正常組比起來有些不透明，但比高脂飲食組要透明的多，動脈弓上脂質(zhì)斑塊也很少
　　 5.8周實驗后，通過wester

14、nBlotting(蛋白質(zhì)印跡)的方法檢測肝臟組織中GRP78的水平，分析得出的條帶顯示(見圖4-4)：H組與N組小鼠相比內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志蛋白grp78明顯升高，HE組比E組的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志蛋白grp78高，但沒有H組那么高；E組與N組小鼠相比內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志蛋白grp78水平變化不明顯；而HE內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志蛋白grp78明顯低于H組。
　　 6.8周實驗后，經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)：H組80％(8/10)的小鼠的肝臟的顏色與N組比顏色發(fā)白(見圖

15、4-5，4-6)，并且在70％(7/10)的小鼠的膽囊中發(fā)現(xiàn)有白色的小顆粒(見圖4-7，4-8)。而E組和HE組小鼠的肝臟和膽囊中就沒有發(fā)現(xiàn)有次癥狀。此現(xiàn)象有可能是脂肪肝和膽結(jié)石。
　　 結(jié)論：
　　 1.有氧運動可明顯改善高脂飲食所導致的小鼠血脂代謝紊亂。
　　 2.有氧運動可減少高脂飲食導致的動脈粥樣硬化斑塊的形成。
　　 3.有氧運動不足以使正常機體發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激但可以顯著降低高脂飲食小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激