百喜草高效再生體系建立及EMS誘變技術初探.pdf

1、百喜草(Paspalum notatum Flgge)是禾本科黍亞科雀稗屬多年生草本植物，具多抗性優(yōu)點，是一種“多用型”的優(yōu)良草種，已在全球熱帶、亞熱帶地區(qū)廣泛栽培，被應用于嚴重侵蝕地保持水土、山地陡坡治理、公路鐵路護坡、江河湖堤護堤、防風固沙治沙、林下植草改良土壤、紅壤果園種草免耕、紅壤梯田護壁，紅壤荒地人工草場建設、山邊溝、農用車道草皮、牧草飼料飼養(yǎng)畜禽、菌草利用培植食用菌、植物凈化治理污染等環(huán)境治理、環(huán)境保護與生態(tài)恢復和改善農業(yè)生

2、態(tài)環(huán)境、生態(tài)草坪綠化環(huán)境等。本研究目的是建立百喜草高效愈傷組織再生體系，探索離體培養(yǎng)結合EMS誘變技術的程序和方法，以期獲得各種突變體，創(chuàng)新種質資源和材料以培育新品種，更好地為生產服務。通過以百喜草種子為外植體，基本培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基，3％蔗糖，瓊脂7 g/L，pH5.8，以基本培養(yǎng)基附加0.5～4.0mg/L2，4-D誘導愈傷組織試驗，探索誘導愈傷的最適培養(yǎng)基；以基本培養(yǎng)基附加0.5～2.0 mg/L2，4-D與O～0.6mg/L6

3、-BA組合處理繼代培養(yǎng)試驗篩選繼代培養(yǎng)基；以基本培養(yǎng)基附加0～5.5mg/L6-BA與0～3.0mg/LKT組合處理進行分化試驗篩選分化培養(yǎng)基；以1/2MS(MS大量元素減半，鐵鹽、微量、有機為MS全量)為基本培養(yǎng)基，設置不加生長調節(jié)劑、附加1.0mg/LNAA、附加0.5mg/LNAA+0.4mg/LIBA三種培養(yǎng)基，蔗糖濃度均為1.5％，篩選生根培養(yǎng)基。在此基礎上，以胚性愈傷組織為誘變材料，以0～0.4％EMS與0.5～4 h處理時

4、間組合處理胚性愈傷組織進行試驗，探索組織培養(yǎng)結合EMS誘變的程序和方法。研究初步獲得以下結果：
　　 1、誘導愈傷組織的最適培養(yǎng)基為MS+1 mg/L2，4-D，暗培養(yǎng)60天愈傷組織誘導率達56％，初代誘導的愈傷中就有胚性愈傷出現(xiàn)。
　　 2、繼代培養(yǎng)最適培養(yǎng)基為MS+1mg/L2，4-D+0.2mg/L6-BA，愈傷增殖快并能增加胚性愈傷和保持胚性愈傷；
　　 3、分化最適培養(yǎng)基為MS+4.5mg/L6-BA+

5、2mg/LKT，分化率達96.7％，分化的苗苗數(shù)多，較高且健壯整齊；
　　 4、生根培養(yǎng)基為1/2MS(MS大量元素減半，鐵鹽、微量、有機為MS全量)+0.5mg/LNAA+0.4 mg/LIBA(1.5％蔗糖)，生根率達90％。
　　 5、成功建立起百喜草高效愈傷組織再生體系。
　　 6、生根組培苗洗凈根部瓊脂，經液培過渡培養(yǎng)1～2周后，移栽入土壤成活率達95％。
　　 7、EMS誘變胚性愈傷的“半致死