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1、隨著馬鈴薯新品種的出現(xiàn)以及在生產(chǎn)上的應(yīng)用推廣,由于基因型的差異,其脫毒快繁的培養(yǎng)體系及試管薯形成的條件有明顯的差異。本論文以引進(jìn)日本馬鈴薯新品系06-10為試驗(yàn)材料,對(duì)其節(jié)間培養(yǎng)及其增殖的條件進(jìn)行了探討,系統(tǒng)地研究了馬鈴薯高效再生體系建立和試管微型薯的誘導(dǎo),建立起該日本馬鈴薯新品系的高效再生體系,對(duì)該馬鈴薯試管薯離體快繁的影響因素及調(diào)控機(jī)理進(jìn)行了初步研究。在試驗(yàn)中成功獲得了一批無(wú)菌苗,誘導(dǎo)出了試管微型薯,為今后的研究工作提供了材料和基礎(chǔ)
2、。試驗(yàn)結(jié)果表明: 1.啟動(dòng)培養(yǎng)時(shí)用0.1%HgCl27min+75%的乙醇15s體表滅菌對(duì)該馬鈴薯品種的嫩莖消毒處理效果最佳,其污染率為12.5%。且最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/LJAA+0.1mg/LKT,芽分純成菌率最高達(dá)到了81.25%。 2.不定芽的增殖。以日本馬鈴薯品系06-10節(jié)間為外植體,探討了不同激素及組合、不同蔗糖濃度處理等對(duì)其不定芽分化及增殖的影響。結(jié)果表明:(1)適宜的不定芽分化的單因子激素誘
3、導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+CPPU0.15mg/L、MS+6—BA1.5mg/L、MS+NAA0.1mg/L不定芽分化率分別達(dá)100%和94%,GA對(duì)不定芽的誘導(dǎo)呈現(xiàn)不規(guī)則的變化,且CPPU的作用強(qiáng)于6—BA、NAA、GA;(2)雙因子激素組合比單一因素更有利于馬鈴薯試管苗的繼代培養(yǎng)。馬鈴薯試管苗繼代培養(yǎng)中低濃度NA(0.1mg/L)與適當(dāng)濃度CPPU(0.15mg/L)配合使用、中高濃度GA(1.5mg/L)與適當(dāng)濃度CPPU(0.15 mg/
4、L)配合使用有利于苗的生長(zhǎng),能夠改善苗的綜合素質(zhì);(3)蔗糖濃度為30g/L對(duì)試管苗的培養(yǎng)效果最佳;適當(dāng)濃度的CPPU、NAA、GA組合,對(duì)馬鈴薯試管苗繼代增殖培養(yǎng)效果顯著;適當(dāng)?shù)腃CC濃度(200mg/L)可以增加莖粗,對(duì)縮短試管苗的節(jié)間距效果顯著。 3.試管微型薯的誘導(dǎo)。(1)不同外源激素組合誘導(dǎo)試管薯的效果不同,結(jié)果表明:以激素組合NAA+ CPPU+ GA對(duì)試管微型薯的誘導(dǎo)效果最好;400 mg/L CCC+CPPU0.
5、15mg/L處理促進(jìn)了日本馬鈴薯品種06-10提早結(jié)薯,使單瓶試管薯數(shù)量、結(jié)薯率均有顯著增加;(2)8%蔗糖有利于誘導(dǎo)試管薯的誘導(dǎo);(3)光照8h培養(yǎng)對(duì)馬鈴薯試管薯的誘導(dǎo)效果最佳。 4.不定根的誘導(dǎo)。本試驗(yàn)研究了不同濃度的CPPU、6—BA、GA、NAA及組合配比對(duì)不定根形成的影響。結(jié)果表明:(1)根系最適宜的單因子激素誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+NAA1.0mg/L,生根率達(dá)100%;(2)多因子激素誘導(dǎo)試管苗生根效果明顯好于單因子的,
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