混合信號(hào)誘導(dǎo)的大鼠骨髓干細(xì)胞復(fù)合支架成牙的體內(nèi)研究.pdf

1、目的：探究經(jīng)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP-2）混合信號(hào)誘導(dǎo)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）與明膠海綿或聚乙烯醇-雙相陶瓷骨（PVA-DCCP）三維（3D）打印支架材料復(fù)合在體內(nèi)環(huán)境中的成牙潛能。
　　方法：將取自SD大鼠的BMSCs與牙胚細(xì)胞在bFGF和BMP-2混合信號(hào)誘導(dǎo)的微環(huán)境中共培養(yǎng)后分別接種于明膠海綿及3D打印的PVA/DCCP復(fù)合支架材料上，然后回植入同種異體SD大鼠腎被膜下。受試SD

2、大鼠隨機(jī)分為五組：A組-單純信號(hào)（牙胚細(xì)胞）誘導(dǎo)BMSCs/明膠海綿組；B組-混合信號(hào)（牙胚細(xì)胞、bFGF及BMP-2）誘導(dǎo)BMSCs/明膠海綿組；C組-單純信號(hào)誘導(dǎo)BMSCs/PVA-DCCP三維打印支架組；D組-混合信號(hào)誘導(dǎo)BMSCs/PVA-DCCP三維打印支架組；E組-完整牙胚組織。在回植后的第1、3、7、14、28天采集回植物樣本，用實(shí)時(shí)定量PCR（RT-PCR）檢測(cè)成牙基因成釉蛋白（AMBN）、牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1（DMP1）、

3、?型膠原蛋白（Collagen-?）以及同源異型盒基因1（DLX1）的mRNA水平，用蘇木精－伊紅（HE）染色法觀測(cè)各組樣本的組織學(xué)改變。
　　結(jié)果：RT-PCR定量分析得，除Collagen-?的表達(dá)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加外，AMBN、DMP1、DLX1三個(gè)基因均呈逐漸下降趨勢(shì)，各基因在不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量與完整牙胚（E組）均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P﹤0.05）。上述四個(gè)成牙相關(guān)基因的mRNA相對(duì)表達(dá)水平在不同支架材料組之間差異具

4、有顯著性（P﹤0.001）；不同成牙信號(hào)組之間對(duì)各個(gè)基因有影響，但不如支架材料明顯。HE染色可見，牙胚組織（E組）植入腎被膜28天后形成大鼠正常磨牙樣形態(tài)結(jié)構(gòu)；經(jīng)牙胚細(xì)胞、bFGF及BMP-2混合信號(hào)誘導(dǎo)的BMSCs種植于明膠海綿回植后可形成不完整的類牙樣結(jié)構(gòu)（B組），但與正常牙組織形態(tài)有一定差別；A、C、D組未見明顯的類牙樣礦化組織形成，但在PVA-DCCP三維打印支架組（C、D）組支架材料吸收不完全。
　　結(jié)論：在體內(nèi)模擬環(huán)境